基于OPG-RANKL-RANK通路探讨桂枝芍药知母汤对CIA大鼠骨代谢的影响OA

目的:基于骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)-核因子κB受体激动剂配基(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)-核因子κB受体激动剂(receptor activator of nuclear factorκB,RANK)信号通路探讨桂枝芍药知母汤调节胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠骨代谢的作用机制。方法:60只大鼠随机分为正常组、模型组、桂枝芍药知母汤低剂量组(8.6 g·kg^(-1))、桂枝芍药知母汤中剂量组(17.2 g·kg^(-1))、桂枝芍药知母汤高剂量组(34.4 g·kg^(-1))及雷公藤多苷组(0.01 g·kg^(-1)),每组10只。将牛Ⅱ型胶原蛋白与完全弗氏佐剂充分乳化,在大鼠左足跖及尾根部皮内注射2次建立CIA模型。造模后,4个药物组大鼠以相应药物灌胃,正常组和模型组大鼠以等剂量蒸馏水灌胃,连续4周。测量大鼠双足踝排水体积,TRAP染色检测大鼠踝关节损伤程度,ELISA检测大鼠血清Ⅰ型胶原C端肽(C-telopeptide of typeⅠcollagen,CTX-Ⅰ)、骨钙素、巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平,免疫组化染色检测大鼠踝关节RANKL、OPG表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠双足排水体积增加(P<0.05);与模型组比较,4个药物组大鼠右足排水体积减小(P<0.05)。TRAP染色显示,与正常组比较,模型组大鼠踝关节的阳性反应、炎症及骨破坏评分升高(P<0.05);与模型组比较,雷公藤多苷组、桂枝芍药知母汤高剂量组及中剂量组大鼠踝关节的阳性反应、炎症及骨破坏评分降低(P<0.05)。ELISA显示,与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α和IL-1β水平升高(P<0.05);与模型组比较,4个药物组大鼠血清TNF-α和IL-1β水平降低(P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠血清CTX-Ⅰ、M-CSF水平升高,骨钙素水平降低(P<0.05);与模型组比较,桂枝芍药知母汤高剂量组大鼠血清CTX-Ⅰ、M-CSF水平降低,骨钙素水平升高(P<0.05)。免疫组化染色显示,与正常组比较,模型组大鼠踝关节RANKL与OPG表达量及RANKL/OPG比值升高(P<0.05);与模型组比较,4个药物组大鼠踝关节RANKL与OPG表达量及RANKL/OPG比值降低(P<0.05)。结论:桂枝芍药知母汤可能通过调控OPG-RANKL-RANK信号通路,抑制炎症反应,改善骨代谢,从而延缓骨质破坏。