Slit2/Robo1/srGAP1在牦牛脑组织中的表达与定位分析OA

为了研究Slit2/Robo1/srGAP1在牦牛脑组织的表达,采集成年(3~5岁)牦牛脑组织,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)、免疫组织化学(IHC)技术检测Slit2、Robo1、srGAP1、p53在大脑皮质、小脑、海马、丘脑和延髓中的表达量与定位。qRT-PCR、WB及IHC光密度分析结果显示,成年牦牛大脑皮质和海马中的Slit2、Robo1、srGAP1 mRNA和蛋白表达显著高于丘脑、延髓及小脑(P<0.05),另外p53的mRNA和蛋白表达在5个部位之间无显著差异。IHC结果显示Slit2、Robo1和srGAP1阳性反应主要分布在神经元胞质,p53免疫阳性反应在神经元胞质和胞核都有所表达。免疫荧光(IF)结果显示,Slit2、Robo1、srGAP1、p53与神经元抗体(NeuN)共定位,主要在神经元表达。以上结果表明,Slit2、Robo1、srGAP1在大脑皮质和海马的高表达,可能导致p53的表达水平降低,减少了大脑皮质和海马神经元的凋亡,使牦牛大脑皮质和海马适应高原环境。另外,以上4种因子均在神经元胞质表达,说明它们可能主要在神经元发挥保护作用。本研究为深入探讨牦牛中枢神经系统在低氧环境下的适应机制提供了基础数据。