基于网络药理学和实验验证探讨附萸汤治疗慢性心力衰竭的作用机制OA

目的 基于网络药理学和实验验证探究附萸汤治疗慢性心力衰竭(CHF)的作用机制。方法 (1)利用网络药理学筛选附萸汤治疗CHF的有效成分、核心靶点及关键信号通路,并将核心靶点与关键有效成分进行分子对接。(2)取100只雄性SD大鼠,随机选择其中80只,通过线栓结扎左冠状动脉前降支方法构建大鼠心肌梗死后CHF模型,剩余20只大鼠作为假手术组(仅进行相同的手术操作,不进行结扎)。术后4周将CHF模型构建成功大鼠随机分为模型组、卡托普利组、附萸汤低剂量组、附萸汤高剂量组,每组20只。卡托普利组给予6.75 mg/kg的卡托普利灌胃,附萸汤低、高剂量组分别给予2.5 g/kg、5.0 g/kg的附萸汤灌胃,假手术组和模型组均给予等量的生理盐水灌胃,均1次/d,持续灌胃8周。超声心动图检测心功能指标[左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩窄率(FS)、左室舒张末期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVIDs)],TTC染色检测心肌梗死面积,HE染色和Masson染色观察心肌结构和胶原沉积情况,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡情况,Western blot法检测心肌组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达情况。结果 网络药理学筛选得到附萸汤有效成分107个和对应靶点116个,疾病作用靶点110个。通过核心靶点筛选和分子对接得出涉及细胞对外源性刺激的反应生物学进程、核受体活性分子功能及化学致癌-受体激活、脂质与动脉粥样硬化等通路,核心靶点主要为AKT1、CASP3、CCDN1、RELA,核心成分主要为柚皮素、槲皮素、山柰酚、异鼠李素。动物实验验证显示:与模型组比较,各药物组大鼠LVEF、FS及心肌组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),LVIDd、LVIDs均明显缩短(P均<0.05),心肌梗死面积占比、心肌细胞凋亡率及心肌组织中Caspase-3和Bax蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),心肌损伤减轻,心肌胶原沉积减少。结论 附萸汤可以通过多成分、多靶点、多通路改善CHF大鼠心功能,其中调控PI3K/Akt通路,从而抑制心肌细胞凋亡可能是其关键机制。