Yap/Taz在咬合力缺失后牙槽骨骨改建中的作用研究OA

目的:探讨Yap/Taz在咬合力缺失后牙槽骨骨改建中的作用。方法:选取8周龄雄性C57BL/6J小鼠,通过拔除左侧上颌第一磨牙建立下颌牙槽骨咬合力缺失模型(失咬合力组),并以对侧牙槽骨作为对照。分别于术后1、2、4周收集样本,应用微型CT(Micro-CT)扫描与三维重建,定量分析骨矿物密度(bone mineral density,BMD)、骨体积分数(bone volume/total volume,BV/TV)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)和骨小梁数目(trabecular number,Tb.N)的变化;应用免疫荧光染色法观察牙槽骨内CD105+间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的数量变化;实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测牙槽骨内Yap/Taz的基因表达变化。体外分离培养小鼠牙槽骨来源的MSCs,通过转染小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲降Yap/Taz表达,采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法观察ALP阳性区域的变化,采用RT-qPCR观察Runx2、Sp7、Col1a1和Bglap的基因表达变化,评估Yap/Taz敲降对MSCs成骨分化的影响。结果:咬合力缺失4周后,与对照组相比,失咬合力组牙槽骨的BMD和BV/TV显著下降(P<0.05),MSCs(CD105+细胞)数量显著减少(P<0.05),且Yap/Taz的基因表达亦显著下调(P<0.05)。体外实验表明,敲降Yap/Taz后,与对照组相比,敲降组MSCs的ALP阳性区域减少,Runx2、Sp7、Col1a1和Bglap的基因表达显著下调(P<0.05)。结论:咬合力缺失引起牙槽骨量丢失、MSCs减少及Yap/Taz下调,而Yap/Taz敲降可抑制MSCs成骨分化。