骨髓间充质干细胞联合富血小板纤维蛋白治疗小鼠颞下颌关节骨关节炎的研究OA

目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)联合富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)对小鼠颞下颌关节骨关节炎(temporomandibular joint osteoarthritis,TMJOA)的治疗作用。方法:分离培养C57BL/6J小鼠BMSCs,通过流式细胞术检测其表面标志物CD29、CD44、CD90、CD105、CD166的表达,并通过成骨、成脂、成软骨诱导实验验证其多向分化能力。选取120只8周龄C57BL/6J小鼠,采用关节盘摘除法构造TMJOA模型,经眼眶取血0.1 mL制作PRF。将小鼠双侧关节根据不同处理分为4组:对照组(关节盘摘除后注射20μL完全培养液)、BMSCs+PRF组(关节盘摘除后植入PRF并注射20μL BMSCs悬液)、BMSCs组(关节盘摘除后注射20μL BMSCs悬液)和PRF组(关节盘摘除后仅植入PRF)。于术后1、2、4、8周分批处死小鼠,取髁突组织进行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色及番红O染色,采用改良Mankin评分系统评估髁突软骨骨关节炎的严重程度,于8周时采用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测软骨相关基因(Aggrecan、Sox9、Col1a1、Col2a1)的表达情况。结果:经流式细胞术及三向诱导分化实验鉴定,本研究分离的细胞具有BMSCs的典型特征。组织学评价显示,与对照组相比,BMSCs+PRF组髁突软骨改良Mankin评分明显降低,提示软骨退变程度明显减轻;同时,RT-qPCR结果显示,BMSCs+PRF组软骨相关基因Aggrecan、Sox9、Col1a1、Col2a1的mRNA表达水平显著提高,且差异具有统计学意义。结论:关节腔内联合应用BMSCs及PRF可有效缓解小鼠TMJOA进展,促进软骨修复。