大柴胡汤通过PI3K/AKT信号通路调控腺泡细胞自噬减轻慢性胰腺炎的机制研究OA

目的:探讨大柴胡汤(Dachaihu decoction,DCHD)通过调控腺泡细胞自噬对慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)的治疗作用及机制。方法:采用50μg/kg雨蛙素(caerulein)诱导小鼠CP模型,给予DCHD治疗,通过HE染色、免疫组化、免疫荧光染色、转录组测序、Western blot和RT-qPCR,检测小鼠胰腺组织损伤及自噬相关指标。运用网络药理学方法筛选DCHD活性成分,明确其调控自噬的核心靶点及相关信号通路。同时采用100 nmol/L caerulein诱导266-6腺泡细胞损伤,观察DCHD含药血清的作用及机制。结果:HE染色显示CP小鼠胰腺组织存在炎症、纤维化及腺泡细胞萎缩,免疫组化染色可见淀粉酶表达明显减少,而经DCHD治疗后以上损伤显著减轻,淀粉酶表达显著增多(P<0.05),α-平滑肌肌动蛋白、I型胶原、巨噬细胞标志物F4/80及白细胞介素6表达显著降低(P<0.05)。转录组测序分析显示自噬相关途径被显著富集,动物实验结果证实,CP组小鼠胰腺组织中P62表达增加,微管相关蛋白1轻链3A/B(microtubule-associated protein 1 light chain 3A/B,LC3A/B)-II/LC3A/B-I比值降低(P<0.01),而DCHD治疗后,P62蛋白表达显著减少,而LC3A/B-II/LC3A/B-I比值显著增高(P<0.05)。网络药理学分析显示:DCHD调控CP自噬障碍可能与磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)信号通路有关,进一步通过在体和腺泡细胞实验证实:DCHD治疗后胰腺组织和腺泡细胞p-PI3K/PI3K表达降低的同时,P62表达也明显减少(P<0.05)。结论:大柴胡汤通过抑制PI3K/AKT信号通路调控腺泡细胞自噬稳态,从而保护胰腺外分泌功能,发挥防治CP的作用。