小青龙汤对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠右心功能的影响及机制OA

目的:本研究拟通过建立野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压(PAH)大鼠模型,系统评估小青龙汤对模型大鼠右心功能的保护效应,并进一步揭示其调控右心功能的作用机制。方法:60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,小青龙汤低、中、高剂量(XQLT-L、XQLT-M、XQLT-H)组和贝前列素钠片(BST)组,除正常组外,其余各组大鼠使用MCT(60 mg·kg^(-1))单次皮下注射诱导PAH模型,注射3周后,XQLT-L/M/H组分别灌胃小青龙汤3.07、6.14、12.28 g·kg^(-1)·d^(-1),BST组灌胃贝前列素钠12.6μg·kg^(-1)·d^(-1),模型组灌胃等量生理盐水,共给药3周。右心导管插管法检测右心室收缩压(RVSP);超声心动图评价心功能;右心室组织称质量计算右心室肥厚指数(RVHI);苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色、透射电镜观察心脏组织形态;超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)分析血清代谢组变化;数据非依赖采集蛋白质组学检测右心室差异蛋白,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测解偶联蛋白3(UCP3)、磷酸肌醇3-激酶α催化亚基p110α(PIK3CA)、L1细胞黏附分子(L1CAM)、醌氧化还原酶(CRYZ)蛋白表达;UPLC-MS/MS分析小青龙汤的药物组成成分。结果:与正常组比较,模型组大鼠RVSP和右心肥厚指数(RVHI)明显升高(P<0.05),心肌组织形态出现病理性改变;与模型组比较,各给药组RVSP和RVHI不同程度降低、心功能和心肌组织形态显著改善,小青龙汤各给药组中,XQLT-M组药效最佳(P<0.05),与BST组接近。血清代谢组结果显示,与模型组比较,小青龙汤组出现105个差异代谢物[变量重要性投影(VIP)值>1且P<0.05],其中58个升高,47个降低,京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库富集提示,小青龙汤的干预导致苯丙氨酸代谢下调(P<0.01),而不饱和脂肪酸生物合成上调(P<0.05)。蛋白质组学结果显示,与正常组比较,MCT诱导右心室出现982个差异蛋白,其中455个蛋白上调、527个蛋白下调(差异倍数(FC)>1.3,P<0.05);与模型组比较,小青龙汤组出现237个蛋白差异表达,其中124个蛋白上调,113个蛋白下调,二者有57个共有差异蛋白,KEGG富集提示,小青龙汤主要参与矿物质吸收、核糖体生物发生、过氧化物酶体、糖酵解/糖异生、剪接体、甲状腺激素信号通路等调节。Western blot显示与模型组比较,小青龙汤组UCP3、PIK3CA、L1CAM蛋白表达上调,CRYZ蛋白表达下调(P<0.05)。结论:小青龙汤对MCT诱导PAH大鼠具有右心功能保护作用,其机制与维持心肌稳态、减轻右心室重构有关。