基于内质网应激PERK/ATF4/CHOP信号通路探讨参麦注射液改善NSCLC顺铂耐药性的机制OA

目的:基于蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/活化转录因子4(ATF4)/C/EBP同源蛋白(CHOP)内质网应激通路探讨参麦注射液(SMI)改善非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂耐药性的作用机制。方法:将人肺癌顺铂耐药株(A549/cis)荷瘤成功的BALB/c无胸腺裸鼠随机分为空白组(0.9%氯化钠)、顺铂组(5μg·g^(-1))、参麦注射液组(5.2 mg·g^(-1))、参麦注射液联合顺铂组(5.2 mg·g^(-1)+5μg·g^(-1)),施以药物干预4周。记录小鼠体质量和肿瘤体积,并采用苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤组织病理形态,透射电镜观察肿瘤组织细胞内质网形态,免疫组化法检测肿瘤组织PERK、ATF4和CHOP阳性表达含量,蛋白免疫印迹法检测肿瘤组织免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)、PERK、磷酸化(p)-PERK、真核翻译起始因子2α激酶(eIF2α)、p-eIF2α、ATF4、CHOP、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。将A549/cis细胞分为空白组(正常培养基)、顺铂组(23.3μmol·L^(-1))、参麦注射液组(20 g·L^(-1))、参麦注射液联合组(20 g·L^(-1)+23.3μmol·L^(-1)),细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞活力,透射电镜观察细胞内质网形态,蛋白免疫印迹法检测内质网应激和凋亡相关蛋白。结果:与顺铂组比较,参麦注射液联合顺铂组小鼠体质量明显增加(P<0.05),肿瘤体积明显减小(P<0.05),组织细胞内质网扩张,PERK、ATF4和CHOP阳性表达明显增加(P<0.05),肿瘤组织BIP、p-PERK/PERK,p-eIF2α/eIF2α,ATF4、CHOP、Bax蛋白表达明显增加(P<0.05),Bcl-2表达明显降低(P<0.05)。体外实验中,与顺铂组比较,参麦注射液联合顺铂组细胞存活率明显降低(P<0.05),细胞内可观察到明显的内质网扩张,甚至囊泡变,细胞BIP、p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α、ATF4、CHOP和Bax蛋白表达明显增加(P<0.05),Bcl-2表达明显降低(P<0.05)。结论:参麦注射液联合顺铂治疗NSCLC具有协同增效抑瘤作用,可能与内质网应激PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路激活,诱导肿瘤细胞凋亡有关。