络通纤溶饮抑制STAT3/HIF-1α介导的糖酵解改善特发性肺纤维化大鼠肺损伤OA

目的:考察络通纤溶饮调控糖酵解改善特发性肺纤维化(IPF)大鼠肺损伤的作用特点及潜在机制。方法:40只SPF级SD大鼠随机分为假手术组(10 mL·kg^(-1))、模型组(10 mL·kg^(-1))、络通纤溶饮组(15.18 g·kg^(-1))和尼达尼布组(0.1 g·kg^(-1)),每组10只。气管内滴注博莱霉素制备IPF大鼠模型,灌胃干预28 d后,行肺功能检测,苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)染色观察肺组织病理特征;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肺组织炎症相关因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6含量;化学发光法检测肺组织乳酸含量和乳酸脱氢酶活性;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)蛋白水平以分析肺组织胶原沉积情况,检测己糖激酶2(HK2)、M2型丙酮酸激酶同工酶(PKM2)、6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)蛋白表达以分析糖酵解水平;网络药理学解析络通纤溶饮影响IPF的潜在靶点与相关信号通路,分子对接分析络通纤溶饮药物活性成分与潜在靶点的结合能;Western blot检测潜在靶点与信号通路相关蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠主气道阻力(Rn)、呼吸系统阻力(Rrs)显著升高,呼吸系统顺应性(Crs)显著下降(P<0.01);肺组织可见炎症浸润和胶原沉积,肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6含量与TGF-β_(1)、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达水平显著升高(P<0.01);肺组织乳酸含量、乳酸脱氢酶活及HK2、PKM2、PFKFB3蛋白表达水平显著升高(P<0.01);网络药理学分析结果显示,信号转导与转录激活因子3(STAT3)为络通纤溶饮影响IPF的关键靶点,缺氧诱导因子-1(HIF-1)为关键信号通路;肺组织磷酸化(p)-STAT3、HIF-1α表达水平较假手术组显著升高(P<0.01)。与模型组比较,络通纤溶饮组大鼠Rn、Rrs显著降低,Crs显著升高(P<0.01);肺组织炎症浸润损伤和胶原沉积程度显著减轻,TNF-α、IL-1β、IL-6含量与TGF-β_(1)、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达水平显著降低(P<0.01);肺组织乳酸含量、乳酸脱氢酶活及HK2、PKM2、PFKFB3蛋白表达水平显著降低,p-STAT3、HIF-1α表达水平显著下降(P<0.01)。结论:络通纤溶饮可通过调控STAT3/HIF-1α信号通路介导的糖酵解改善IPF大鼠肺组织损伤。