柴芪益肝颗粒改善肝细胞癌的作用机制预测及验证OA

目的预测柴芪益肝颗粒改善肝细胞癌(HCC)的作用机制,并进行验证。方法采用网络药理学方法预测柴芪益肝颗粒改善HCC的信号通路。采用腋下注射肝癌细胞H22的方法构建肝癌移植瘤模型小鼠,将造模成功的小鼠随机分为模型组(生理盐水)、索拉非尼组(阳性对照,50 mg/kg)和柴芪益肝颗粒低、中、高剂量组(24.83、49.66、99.32 g/kg),每组10只。各组小鼠灌胃相应药液或生理盐水,每日1次,连续14 d。末次给药后,观察小鼠肿瘤组织病理学形态,采用免疫组化法检测小鼠肿瘤组织中细胞核增殖抗原Ki-67表达,采用Western blot法检测小鼠肿瘤组织中上皮间质转化[N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(Ecadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶7(MMP7)]和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路[p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2]相关蛋白表达。结果网络药理学结果显示,代谢通路、癌症通路、MAPK信号通路等可能是柴芪益肝颗粒改善HCC的关键信号通路。动物实验验证结果显示,模型组小鼠肿瘤组织中肿瘤细胞密集、生长状态旺盛;与模型组比较,柴芪益肝颗粒高剂量组小鼠肿瘤组织中肿瘤细胞密度降低,肿瘤组织中Ki-67、N-cadherin、MMP7、Vimentin蛋白表达水平和ERK1/2、JNK蛋白磷酸化水平均显著降低(P<0.05),Ecadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),p38 MAPK蛋白磷酸化水平升高但差异无统计学意义(P>0.05)。结论柴芪益肝颗粒可通过调控MAPK信号通路,抑制上皮间质转化,从而抑制肿瘤细胞侵袭和转移,进而发挥改善HCC的作用。