茯虎祛湿方通过抑制FGFR4/NF-κB信号通路改善小鼠湿疹的作用研究OA

目的:探究茯虎祛湿方(FH)对2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导的急、慢性湿疹模型小鼠的治疗作用。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术对FH化学成分进行分析鉴定;建立DNCB刺激诱导的急、慢性湿疹小鼠模型,观测湿疹小鼠瘙痒次数及其耳肿胀度;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察慢性湿疹小鼠耳组织的病理变化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测慢性湿疹小鼠血清IL-1β和IgE的水平;采用免疫组织化学染色法检测慢性湿疹小鼠耳组织TNF-α、IL-6、p-p65、p-p38和FGFR4表达;应用分子对接技术对响应排名前5的化学成分与FGFR4之间的亲和力进行验证。结果:FH中含有丹皮酚、白鲜碱、梣酮、虎杖苷、黄芩苷、芦丁、槲皮素、牡丹皮苷E、芍药苷、没食子酰芍药苷等96种化学成分。与对照组比较,模型组小鼠瘙痒次数显著增加,耳肿胀明显;慢性湿疹模型组小鼠表皮层出现角化过度或角化不全,颗粒层及棘层肥厚,真皮层水肿及炎症细胞浸润,血清中IL-1β和IgE水平升高(P<0.05),且耳组织中TNF-α、IL-6、TLR4、p-p65和p-p38的表达增加(P<0.05)。与模型组比较,FH给药能减少急、慢性湿疹小鼠瘙痒次数,减轻其耳肿胀情况,改善慢性湿疹小鼠病理表现,降低其血清中IL-1β和IgE水平(P<0.05)。分子对接结果显示,FH中主要成分与FGFR4具有较好的亲和力。免疫组化结果显示,FH能抑制慢性湿疹小鼠耳组织FGFR4、p-p65、p-p38、TNF-α和IL-6的表达。结论:FH能抑制DNCB诱导的湿疹模型小鼠的炎症反应,其机制与抑制FGFR4/NF-κB信号通路相关。