补肾健脾化痰方调控Keap1/Nrf2/HO-1通路对多囊卵巢综合征大鼠性激素水平及胰岛素抵抗的影响OA

目的:探讨补肾健脾化痰方调控环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠性激素水平及胰岛素抵抗的影响。方法:通过来曲唑和高脂饮食构建PCOS大鼠模型,并将其分为模型组、二甲双胍组、补肾健脾化痰方组、补肾健脾化痰方+Nrf2抑制剂组,每组10只,另取10只喂养普通饲料作为正常组。二甲双胍组灌胃剂量为0.3g/kg,补肾健脾化痰方灌胃剂量为16g/kg,补肾健脾化痰方+Nrf2抑制剂组灌胃16g/kg补肾健脾化痰方并腹腔注射Nrf2抑制剂10mg/kg,均1次/d,持续4周。苏木精伊红(HE)染色检测动情周期和卵巢组织病变;血糖仪检测血清空腹血糖(FBG)水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清空腹胰岛素(FINS)、性激素[睾酮(T)、雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡素(FSH)]、血脂指标[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]、炎性因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素18(IL-18)]以及卵巢组织中氧化应激指标[总超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)]变化,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测卵巢组织Keap1、Nrf2、HO-1 mRNA水平;Western blot检测卵巢组织Keap1、Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结果:与正常组相比,模型组大鼠动情周期紊乱,卵泡可见囊性扩增,T、LH、LH/FSH、TG、TC、LDL-C、FINS、FBG、HOMA-IR、TNF-α、IL-18、MDA水平、keap1 mRNA及其蛋白表达水平均升高,E2、HDL-C、SOD、GSH-Px水平、Nrf2、HO-1 mRNA及其蛋白表达水平均降低(P<0.05);与模型组相比,补肾健脾化痰方组大鼠卵泡囊性扩增减少,T、LH、LH/FSH、TG、TC、LDL-C、FINS、FBG、HOMA-IR、TNF-α、IL-18、MDA水平、keap1 mRNA及其蛋白表达水平均降低,E2、HDL-C、SOD、GSH-Px水平、Nrf2、HO-1 mRNA及其蛋白表达水平均升高(P<0.05);补肾健脾化痰方+Nrf2抑制剂组大鼠卵泡囊性扩增增多,血清和卵巢中各指标变化与补肾健脾化痰方组相反(P<0.05)。结论:补肾健脾化痰方可能通过调控Keap1/Nrf2/HO-1通路缓解PCOS大鼠性激素紊乱和胰岛素抵抗。