PACS-2调控巨噬细胞功能参与高血压诱导心脏功能障碍的分子机制OA

[目的]探讨磷酸化弗林酸性簇分选蛋白2(PACS-2)在高血压相关心脏重构和心功能障碍中的作用及其分子机制。[方法]采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)持续输注建立小鼠高血压模型,并结合PACS-2敲除小鼠分组观察。通过收缩压(SBP)和超声心动图检测评估心功能,采用心脏重量/体重比(HW/BW)、心脏重量/胫骨长度比(HW/TL)及心肌细胞横截面积评价心肌肥厚,行Masson染色和免疫组织化学染色检测心肌纤维化,免疫荧光检测巨噬细胞亚群分布,Western blot检测心肌纤维化及炎症信号蛋白表达,q PCR检测炎症及心肌纤维化相关基因表达。同时在体外构建AngⅡ诱导的巨噬细胞模型,结合PACS-2 siRNA转染,检测M1/M2极化及相关功能。[结果]与对照组相比,高血压组小鼠PACS-2及巨噬细胞标志基因Mac-2显著升高,并与Mac-2信号共定位(P<0.05)。高血压组SBP升高(P<0.05),左心室射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)升高(P<0.05),HW/BW、HW/TL及心肌细胞横截面积增大,心房钠尿肽(ANP)和脑钠肽(BNP)表达增加(P<0.05)。心肌纤维化检测结果显示,胶原沉积及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达显著升高,转化生长因子β(TGF-β)和p-Smad2蛋白表达增加(P<0.05)。炎症检测结果显示,高血压组M1型巨噬细胞数量增加,白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)mRNA表达上调,IκB激酶α(IKKα)和p65磷酸化增强(P<0.05),而M2型巨噬细胞相关因子精氨酸酶1(Arg1)、几丁质酶3样蛋白3(Ym1)和白细胞介素10(IL-10)无明显变化。PACS-2敲除显著降低SBP、EF、FS、心肌肥厚及纤维化指标,抑制M1极化及相关炎症因子分泌,并下调TGF-β/Smad和核因子κB(NF-κB)信号(P<0.05)。体外实验显示,AngⅡ诱导M1型巨噬细胞比例及炎症因子表达增加,而PACS-2敲除能有效抑制上述效应(P<0.05),但对M2型巨噬细胞相关因子表达无显著影响。此外,PACS-2敲除能降低巨噬细胞对人脐静脉内皮细胞的黏附和迁移能力(P<0.05)。[结论]PACS-2通过促进M1型巨噬细胞极化和炎症因子分泌并协同激活TGF-β/Smad及NF-κB信号,加重高血压相关心肌肥厚与心肌纤维化。抑制PACS-2可显著减轻心脏重构和炎症反应,提示其为潜在干预靶点。