地骨皮化学成分及其对HT-22细胞铁死亡抑制活性研究OA

目的阐明地骨皮(Cortex lycii)抑制铁死亡活性的药效物质基础。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱等技术,对地骨皮80%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行系统分离纯化,通过核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)、质谱(mass spectrometry,MS)等现代波谱学方法鉴定化合物结构。进一步通过铁死亡激活剂RSL3(ras selective lethal 3,RSL3)诱导的小鼠海马神经元细胞系HT22细胞(mouse hippocampal neuronal cell line,HT22)铁死亡模型评价其铁死亡抑制活性。结果共分离鉴定出19个化合物,分别为二氢咖啡酰酪胺(1)、N-反式-咖啡酰酪胺(2)、N-反式-对-香豆酰基章鱼胺(3)、(2S,E)-N-[2-羟基-2-(4-羟基苯)-乙酯]-阿魏酰胺(4)、tribulusamide A(5)、1,2-dihydro-6,8-dimethoxy-7-hydroxy-l-(3,4-dihydroxyphenyl)-N1,N2-bis-[2-(4-hydroxyphenyl)-ethyl]-2,3-naphthalene dicarboxamide(6)、淫羊藿苷E5(7)、咖啡酸乙酯(8)、阿魏酸乙酯(9)、5α-豆甾-3,6-二酮(10)、豆甾-4-烯-3,6-二酮(11)、豆甾-4-烯-3-酮(12)、7β-羟基谷甾醇(13)、亚油酸(14)、亚麻酸(15)、天师酸(16)、(Z)-9,10,11-三羟基-12-十八碳烯酸(17)、(Z)-9,10,11-三羟基-12-十八碳烯酸甲酯(18)和(S)-coriolic acid ethyl ester(19)。其中化合物5、7、11、12、13、16、18、19为首次从该植物中分离得到。化合物2、5、8和9具有显著抑制铁死亡活性,EC50分别为9.94、18.91、0.99和6.33μmol/L。机制研究提示,化合物5可能经由非抗氧化、非铁螯合的新机制发挥作用;化合物2和8兼具抗氧化与铁螯合能力;化合物9仅具抗氧化活性。结论本研究为阐明地骨皮抑制铁死亡活性的药效物质基础提供了科学基础,发现新的铁死亡抑制剂,为地骨皮的进一步开发利用提供依据和基础。