猪繁殖与呼吸综合征病毒17-0078株的分离与鉴定OA

为明确2017年从山西某猪场疑似蓝耳病发病猪肺组织中分离病毒的种类、致病性及基因组特征,利用PCR检测病料组织中的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV),通过不同细胞系进行病毒分离,并利用电镜观察、血清中和试验和全基因组测序进行鉴定;将鉴定所得毒株病毒液,稀释为3×10^(3.0)、3×10^(4.0)、3×10^(5.0)、3×10^(6.0)TCID_(50)/mL四个剂量,接种10~11周龄健康猪,观察21 d并记录发病、临床症状及剖检病变。结果显示:分离物为美洲型PRRSV,命名为PRRSV-17-0078株。基因组分析表明,该毒株全基因组长度与参考美洲型PRRSV相近,但核苷酸序列与经典毒株有差异,相对于VR2332株,PRRSV-17-0078株NSP2存在131个非连续氨基酸缺失,分别对应于VR2332株NSP2蛋白氨基酸的第322-432、483及504-522位。该毒株可致所有接种猪发病,部分死亡,感染后7 d内体温升至41~41.8℃,持续5~10 d,临床表现可见被毛粗乱、瘦弱、咳嗽、呼吸困难、食欲减退等;剖检主要为间质性肺炎、肺叶片状实变,部分猪淋巴结出血、扁桃体出血等,胃肠道无病变。结果表明,PRRSV-17-0078株可致实验猪高热、高发病率及典型肺脏病变,结合基因变异特征,证实其为PRRSV变异株。本研究阐明了PRRSV-17-0078变异株的致病性与分子特征,为该地区PRRSV的临床诊断、疫苗研发与防控策略制定提供了重要的理论依据。