基于环介导等温扩增技术在青海海东地区鼠疫监测的现场应用OA

目的分析环介导等温扩增(LAMP)技术在青海海东互助县北山地区鼠疫监测的应用效果,并探讨非历史疫源地喜马拉雅旱獭鼠疫感染情况,同时确认该方法在现场鼠疫检测的适用性和有效性。方法采用环介导恒温扩增技术、细菌培养、反向间接血凝试验、金标免疫层析、PCR、荧光定量PCR及宏基因测序方法对北山地区旱獭材料进行检测,比较不同方法在现场工作中的应用效果。结果环介导等温扩增技术在1 h内能特异检测出鼠疫菌,其他检测方法(细菌培养、反向血凝试验、金标免疫层析、PCR)未检测出鼠疫耶尔森氏菌,荧光定量PCR为弱阳性,利用宏基因测序方法对阳性结果进行验证,结果显示存在鼠疫菌基因,证明LAMP敏感性高于其它检测方法,最低检测限为20个菌/μL,结果可通过目视直接进行判定。结论首次在非历史疫源地应用环介导等温扩增技术检测出旱獭鼠疫阳性,因其敏感度高、特异性强的特点,对于提高鼠疫监测效力具有很高的应用价值。