人脐带间充质干细胞通过调控JAK2信号通路改善新生大鼠脑白质损伤的研究OA

目的观察人脐带间充质干细胞通过调控JAK2信号通路对新生大鼠脑白质损伤(WMI)的作用及机制。方法将3日龄Sprague-Dawley大鼠随机分成:假手术(Sham)组、脑白质损伤(WMI)组和HUC-MSC组,每组24只大鼠。采用结扎单侧颈总动脉联合缺氧(8%O2+92%N2)构建新生大鼠WMI模型;提取人脐带间充质干细胞;脑立体定位仪辅助下侧脑室移植HUC-MSC(2×10~5个),分别在建模7、14、21 d后提取脑组织样本,建模28 d后进行水迷宫测试。苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织形态学改变;采用透射电子显微镜和LFB染色对神经纤维髓鞘的表达进行检测;为进一步明确MSCs是否通过调控JAK2通路发挥神经保护作用,将新生大鼠随机分成4组即Sham组、WMI组、HUC-MSC组和NSC42834组(JAK2抑制剂组),在建模21 d后对样本进行采集,采用蛋白免疫印迹实验检测JAK2蛋白和P-JAK2蛋白含量;通过HE染色、尼氏染色和LFB染色评估WMI病理学改变,采用多重免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹实验检测MBP、MAG、Olig2含量。结果与Sham组相比,WMI组目标象限停留时间和平台穿越次数均减少,与WMI组相比,HUC-MSC移植后目标象限停留时间和平台穿越次数增加;HE染色显示Sham组脑白质结构完整,WMI组较Sham组脑白质结构破坏,HUC-MSC组脑白质结构较WMI组改善;透射电子显微镜结果显示,与Sham组相比,WMI组髓鞘轴突数量减少,与WMI组相比,HUC-MSC移植后髓鞘轴突数量增加;与Sham组相比,WMI组P-JAK2蛋白表达增加,与WMI组相比,HUC-MSC组P-JAK2表达减少;与WMI组相比,HUC-MSC组和NSC42834组脑白质结构均改善,细胞形态和神经纤维排列恢复,尼氏小体溶解现象减少,髓鞘表达增加;与Sham组相比,建模14 d后MBP、MAG和Olig2表达减少,与WMI组相比,HUC-MSC组和NSC42834组的MBP、MAG和Olig2蛋白表达均增加。结论HUC-MSC通过抑制JAK2信号通路促进少突胶质细胞成熟,对新生大鼠WMI发挥保护作用。