乌司他丁对脓毒症肝损伤大鼠氧化应激和肠道菌群的影响OA

目的探讨乌司他丁(ulinastatin,UTI)通过调控核转录因子红系2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)信号通路对脓毒症大鼠氧化应激和肠道菌群的影响。方法根据随机数字表法将大鼠分为假手术(Sham)组、盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)组、UTI组(CLP+腹腔注射UTI 100kU/kg),每组6只。造模后24h处死大鼠,腹主动脉取血并获取肝组织,微板法检测丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST),酶联免疫吸附测定法检测氧化应激指标;苏木精-伊红染色观察大鼠肝脏损伤病理学变化,实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠肝组织中Nrf2、HO-1的mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测肝组织中Nrf2、HO-1蛋白表达水平;取大鼠粪便进行16S rRNA基因测序,检测大鼠肠道菌群微生物丰度与多样性。结果CLP组大鼠肝组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、ALT、AST水平均显著高于Sham组,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平显著低于Sham组(P<0.05);UTI组大鼠肝组织中MDA、ALT、AST水平均显著低于CLP组,SOD水平显著高于CLP组(P<0.05)。CLP组肝索排列紊乱,较多肝细胞肿胀、坏死,大量炎症细胞浸润;UTI组肝索排列紊乱有所改善,较少肝细胞肿胀、坏死及炎症细胞浸润。CLP组大鼠肝组织中Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达水平均显著低于Sham组(P<0.05);UTI组大鼠肝组织中Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达水平均显著高于CLP组(P<0.05)。门水平上,与Sham组相比,CLP组厚壁菌门占比降低,拟杆菌门、变形菌门占比上升(P<0.05);与CLP组比较,UTI组厚壁菌门占比上升,拟杆菌门占比下降(P<0.05)。结论UTI可通过调控Nrf2/HO-1信号通路对抗脓毒症引起的氧化应激并维持大鼠肠道菌群稳态,改善脓毒症引起的肝损伤。