家蚕马氏管特异表达基因BmPiT4175启动子的克隆及活性分析OA
【目的】鉴定家蚕Bombyx mori马氏管特异表达基因及其启动子,为家蚕的代谢排泄、解毒及免疫相关基因功能的研究及利用提供新的工具与支撑。【方法】基于家蚕全组织蛋白质组学数据进行马氏管特异表达基因筛选并利用RT-PCR验证基因在家蚕5龄幼虫头、表皮、中肠、脂肪体、马氏管、丝腺、精巢、卵巢、血细胞及气管中的表达;利用qRT-PCR检测家蚕不同发育阶段(卵、3龄眠、4龄幼虫、5龄幼虫、上簇期、蛹和成虫)马氏管中及5龄幼虫头、表皮、中肠、脂肪体、马氏管、丝腺、精巢、卵巢、血细胞和气管中上述特异表达基因的表达量;利用PCR克隆家蚕马氏管特异表达基因BmPiT4175的上游启动子序列,并构建以EGFP为报告基因的转基因载体,获得转基因家蚕,在个体水平验证BmPiT4175上游启动子的活性及组织特异性。【结果】筛选获得了在家蚕马氏管特异表达的基因BmPiT4175;所克隆的BmPiT4175启动子长2955 bp,其驱动的EGFP仅在转基因家蚕马氏管中特异表达,且EGFP与内源基因BmPiT4175的表达量相当。【结论】BmPiT4175的表达模式及其启动子活性都是家蚕马氏管特异的。
刘丽婧;何龙;董照明;唐新;夏庆友;赵萍
重庆中医药学院,重庆市中药研究院,中药创新药物与健康干预重庆市重点实验室,重庆400065 西南大学,生物学研究中心,西部(重庆)科学城种质创制大科学中心,重庆400715西南大学,生物学研究中心,西部(重庆)科学城种质创制大科学中心,重庆400715西南大学,生物学研究中心,西部(重庆)科学城种质创制大科学中心,重庆400715重庆中医药学院,重庆市中药研究院,中药创新药物与健康干预重庆市重点实验室,重庆400065西南大学,生物学研究中心,西部(重庆)科学城种质创制大科学中心,重庆400715西南大学,生物学研究中心,西部(重庆)科学城种质创制大科学中心,重庆400715
生物科学
家蚕马氏管无机磷酸盐协同转运蛋白启动子转基因组织特异表达
《昆虫学报》 2026 (1)
P.14-22,9
国家重点研发计划项目(2022YFD1201600)国家自然科学基金项目(32172798)重庆英才计划优秀科学家项目,新重庆青年创新人才项目(CSTB2024NSCQ-QCXMX0001)重庆市科研机构绩效激励引导专项(CSTB2024JXJL-YFX0085)重庆市中药研究院自主科技计划科研发展基金项目(ygfz20250002)。
评论