三叶青总黄酮通过抑制细胞焦亡和铁死亡改善内毒素介导急性肝损伤的作用研究OA

目的探讨三叶青总黄酮(Radix Tetrastigma hemsleyani flavone,RTHF)通过激活Nrf2信号通路对脓毒症急性肝损伤小鼠焦亡和铁死亡的影响以及分子机制。方法将KM小鼠随机分为6组:对照组、模型组、阳药组(地塞米松10 mg/kg)、RTHF低、中、高剂量组。RTHF低、中、高剂量组分别腹腔注射RTHF 60、90、120 mg/kg预处理7 d,阳药组腹腔注射地塞米松10 mg/kg预处理7 d。用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立脓毒症小鼠模型,24 h后处死小鼠,收集肝、血液标本。通过大体标本与组织病理检查、生化检查以及分子生物学检查验证RTHF治疗脓毒症急性肝损伤的药效及药理机制。结果与模型组相比,RTHF低、中、高剂量组能显著降低小鼠血清ALT、AST、IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-18和肝组织MDA、Fe^(2+)、ROS水平(P<0.01,P<0.05),同时显著提高肝组织SOD、GSH含量(P<0.01,P<0.05)。此外,RTHF低、中、高剂量组小鼠肝组织病理损伤与炎症细胞浸润状况均得到显著改善,肝指数亦有所降低。在分子层面,RTHF能上调细胞核内Nrf2蛋白的表达,以及Nrf2、HO-1、SLC7A11、GPX4蛋白表达水平(P<0.01,P<0.05),并下调Cleaved-Caspase-1、GSDMD-NT蛋白的表达,以及Keap1、NLRP3、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1、GSDMD、GSDMD-NT蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。结论RTHF可通过激活Nrf2信号通路,有效减少炎性因子的释放,缓解氧化应激,抑制铁死亡以及NLRP3介导的细胞焦亡,从而对LPS诱导的脓毒症肝损伤小鼠发挥保护作用。