腹水综合征肉鸡肝脏损伤病理特征及分子调控机制研究OA

为了探究腹水综合征(ascites syndrome, AS)肉鸡肝脏损伤的病理特征及分子调控机制,试验选取7日龄和21日龄疑似AS肉鸡与健康肉鸡各6只,首先对肉鸡进行称重后剖检,同时采集血液、心脏和肝脏样本,通过测定右心室重与全心室重的比值(RV/TV)确定AS肉鸡,并测定肝脏重和肝脏指数;取肝脏组织,制作石蜡切片并进行H.E.染色,观察病理变化,采用免疫组织化学方法检测肝脏组织自噬和凋亡相关蛋白的表达水平,采用实时荧光定量PCR方法检测肝脏组织自噬和凋亡相关蛋白mRNA的相对表达水平;取血液样本,检测血气生化指标。结果表明:7日龄和21日龄疑似AS肉鸡整个腹腔内充满淡黄色的透明液体,腹膜上有少量脂肪堆积;肝脏组织被膜紧张,边缘钝化、变厚,表面呈暗红色。7日龄和21日龄健康肉鸡腹腔无腹水聚积;肝脏组织结构正常,边缘较薄,呈红褐色。7日龄和21日龄疑似AS肉鸡RV/TV均大于0.29,确定为AS肉鸡且发生右心衰竭。与同日龄健康肉鸡比较,7日龄AS肉鸡体重、肝脏重、肝脏指数呈上升趋势但差异不显著(P>0.05),RV/TV显著升高(P<0.05);21日龄AS肉鸡体重呈降低趋势、肝脏重呈上升趋势但差异不显著(P>0.05),RV/TV、肝脏指数显著升高(P<0.05)。7日龄和21日龄健康肉鸡肝小叶结构完整且明显,肝细胞排列整齐、形态正常,肝血窦发达;而7日龄和21日龄AS肉鸡肝脏组织可见明显的空泡变性,肝细胞坏死,伴有炎性细胞浸润及肝血窦淤血。与相同日龄健康肉鸡比较,7日龄和21日龄AS肉鸡肝脏组织自噬相关蛋白P62和ATG5及促凋亡蛋白Caspase3的表达水平呈上升趋势,抗凋亡蛋白Bcl的表达水平呈下降趋势,但均差异不显著(P>0.05);自噬相关基因(P62、Parkin、Beclin1、ATG5)及促凋亡基因(P53、Caspase3、Bak1、Apaf1)的mRNA相对表达水平均呈现上升趋势,抗凋亡蛋白Bcl2的mRNA相对表达水平呈下降趋势,其中7日龄AS肉鸡肝脏组织Parkin的mRNA相对表达水平及21日龄AS肉鸡肝脏组织P53、Bak1和Caspase3的mRNA相对表达水平显著升高(P<0.05),21日龄AS肉鸡肝脏组织P62和Beclin1的mRNA相对表达水平极显著升高(P<0.01、P<0.001)。除21日龄健康肉鸡的Na+浓度显著高于AS肉鸡(P<0.05)外,7日龄和21日龄AS肉鸡其他血气生化指标较相同日龄健康肉鸡均差异不显著(P>0.05)。说明AS肉鸡肝脏组织出现病理损伤,其分子机制表现为自噬-凋亡相关基因和蛋白表达水平的显著失调,从而导致凋亡相关蛋白的异常积累和脂质代谢障碍,引发肉鸡肝脏功能衰竭,最终导致肉鸡死亡。