绞股蓝皂苷调节Shh/Gli1信号通路对乳腺癌大鼠肿瘤生长和转移的影响实验研究OA

目的:探讨绞股蓝皂苷调节音猬因子(Shh)/胶质细胞瘤转录因子1(Gli1)信号通路对乳腺癌大鼠肿瘤生长和转移的影响。方法:选取40只SD雌性大鼠,通过皮下注射大鼠乳腺癌SHZ-88细胞构建乳腺癌大鼠模型,并随机分为SHZ-88组、绞股蓝皂苷-75组(75 mg/kg绞股蓝皂苷)、绞股蓝皂苷-150组(150 mg/kg绞股蓝皂苷)和绞股蓝皂苷-150+Shh/Gli1信号通路激活剂嘌吗啡胺(PM)组(150 mg/kg绞股蓝皂苷+10 mg/kg PM),每组10只。绞股蓝皂苷以灌胃的方式给药,体积为0.5 ml;灌胃后间隔30 min腹腔注射PM;SHZ-88组给予相同剂量的0.9%氯化钠溶液;每日1次,连续21 d。治疗结束收集大鼠血液并记录肿瘤的重量和体积;ELISA检测乳腺癌大鼠血清中癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA15-3)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)浓度;HE染色观察肿瘤和肝组织病理学变化;免疫组织化学染色检测肿瘤组织细胞增殖核抗原(Ki-67)、ER和PR阳性率;TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡率;RT-qPCR检测Shh/Gli1信号通路基因转录水平;Western blot检测Shh/Gli1信号通路及转移相关蛋白表达。结果:与SHZ-88组比较,绞股蓝皂苷-75组和绞股蓝皂苷-150组大鼠肿瘤肿瘤和体积减小,肿瘤细胞排列较为有序且细胞形态完整,肝组织细胞坏死得到改善,转移灶面积占比减少,血清CEA、CA15-3、ER和PR水平降低,肿瘤组织中Ki-67、ER、PR阳性率及Shh、PTCH1、SMO、Gli1 mRNA和Shh、PTCH1、SMO、Gli1、波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平降低,肿瘤细胞凋亡率和肿瘤组织上皮钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达水平升高(均P<0.05)。与绞股蓝皂苷-150组比较,绞股蓝皂苷-150+PM组大鼠肿瘤重量和体积增加,肿瘤细胞变形严重,排列不齐,肝组织病变加剧,转移灶面积占比升高,血清CEA、CA15-3、ER和PR水平升高,肿瘤组织中Ki-67、ER、PR阳性率及Shh、PTCH1、SMO、Gli1 mRNA和Shh、PTCH1、SMO、Gli1、Vimentin蛋白表达水平升高,肿瘤细胞凋亡率和肿瘤组织E-cadherin蛋白表达水平降低(均P<0.05)。结论:绞股蓝皂苷可能通过阻断Shh/Gli1信号通路抑制乳腺癌大鼠肿瘤生长和转移。