基于TLR4/NF-κB通路探讨四君子汤对肌少-骨质疏松症大鼠的改善机制OA

目的基于TLR4/NF-κB通路探讨四君子汤对肌少-骨质疏松症(OS)大鼠的改善机制。方法大鼠随机分为假手术组、OS组、四君子汤低剂量组、四君子汤高剂量组、雌二醇组、四君子汤高剂量+脂多糖(LPS)组,OS模型通过去势联合腹腔注射地塞米松来构建,采用四君子汤和TLR4激活剂LPS分组处理后测定各组大鼠前肢肌力、全身与股骨骨密度、肌肉百分比、股骨远端骨微结构(骨体积分数(BV/TV)、骨表面密度(BS/TV)、骨小梁数(Tb.N)和骨小梁分离度(Tb.Sp));检测各组大鼠股四头肌质量分数,并以HE染色进行股骨组织和股四头肌组织病理检测,比较各组大鼠股四头肌肌纤维横截面积(CSA);以ELISA测定各组大鼠I型前胶原氨基端前肽(PINP)、I型胶原C端肽(CTX-1)、骨钙素(OCN)与血清炎性因子水平;以免疫组化染色与蛋白免疫印迹法检测各组大鼠股四头肌与股骨组织TLR4/NF-κB通路蛋白表达。结果相比假手术组,OS组前肢肌力、全身与股骨骨密度、肌肉百分比、BV/TV、BS/TV、Tb.N、股四头肌质量分数与肌纤维CSA、PINP与OCN水平降低(P<0.05),Tb.Sp、CTX-1、IL-6、IL-1β与IL-17水平、TLR4与p-NF-κB p65阳性表达、TLR4蛋白表达、p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05);相比OS组,四君子汤低与高剂量组、雌二醇组前肢肌力、全身与股骨骨密度、肌肉百分比、BV/TV、BS/TV、Tb.N、股四头肌质量分数与肌纤维CSA、PINP与OCN水平升高(P<0.05),Tb.Sp、CTX-1、IL-6、IL-1β与IL-17水平、TLR4与p-NF-κB p65阳性表达、TLR4蛋白表达、p-NF-κB p65/NF-κB p65降低(P<0.05),而高剂量四君子汤与雌二醇对OS大鼠各病理指标的改善作用更强。相比四君子汤高剂量组,四君子汤高剂量+LPS组前肢肌力、全身与股骨骨密度、肌肉百分比、BV/TV、BS/TV、Tb.N、股四头肌质量分数与肌纤维CSA、PINP与OCN水平降低(P<0.05),Tb.Sp、CTX-1、IL-6、IL-1β与IL-17水平、TLR4与p-NF-κB p65阳性表达、TLR4蛋白表达、p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05)。四君子汤高剂量组各指标与雌二醇组相比无明显变化(P>0.05)。结论四君子汤可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路激活改善OS大鼠肌肉减少与骨质疏松症状。