烟酸和烟酰胺对非酯化脂肪酸诱导的奶牛肝细胞氧化应激和脂质代谢的影响OA

本研究通过体外细胞模型探究烟酸(NA)和烟酰胺(NAM)对非酯化脂肪酸(NEFA)诱导的奶牛肝细胞氧化应激和脂质代谢的影响。试验通过不同浓度NEFA(0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mmol/L)处理奶牛肝细胞12 h,筛选出构建围产期能量负平衡(NEB)模型的最适NEFA浓度。在最适NEFA浓度构建的NEB模型的基础上,分别添加0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L的NA以及0、3、6、9、12、15 mmol/L的NAM,每个浓度设3个重复,处理12 h。结果表明:1)与未添加NEFA组相比,1.2 mmol/L NEFA组肝细胞内甘油三酯(TG)含量极显著升高(P<0.01),培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性显著上升(P<0.05),细胞活力显著降低(P<0.05)。因此,1.2 mmol/L NEFA为构建NEB模型的最适浓度。2)与未添加NA或NAM相比,添加1 mmol/L NA或9 mmol/L NAM可显著或极显著降低培养液中LDH活性和肝细胞内丙二醛(MDA)含量(P<0.05或P<0.01),显著或极显著提升肝细胞内谷胱甘肽(glutathione GSH)含量(P<0.05或P<0.01);添加1 mmol/L NA或10 mmol/L NAM可极显著增加提升细胞活力(P<0.01)。因此,1 mmol/L NA或10 mmol/L NAM为最佳处理浓度。3)与NEFA相比,NA、NAM的添加极显著升高了肝细胞内GSH含量(P<0.01);与NA相比,NAM的添加显著升高了肝细胞内GSH含量(P<0.05)。与NEFA相比,NA和NAM的添加极显著降低了肝细胞内MDA含量(P<0.01);与NAM相比,NA的添加显著降低了奶牛肝细胞内MDA含量(P<0.05)。与NEFA相比,NA的添加极显著升高了奶牛肝细胞内G蛋白偶联受体109A(GPR109A)、脂肪酸去饱和酶2(FADS2)、肉毒碱棕榈酰基转移酶1(CPT1)、过氧化物酶体增殖受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)的mRNA相对表达水平(P<0.01);与NA相比,NAM的添加显著或极显著降低了奶牛肝细胞内GPR109A、FADS2、CPT1、PGC-1α、PPARα的mRNA相对表达水平(P<0.05或P<0.01)。与NEFA相比,NA的添加极显著降低了奶牛肝细胞内二酰基甘油酰基转移酶2(DGAT2)、脂肪酸合成酶(FASN)、沉默信息调节因子1(SIRT1)的mRNA相对表达水平(P<0.01);与NA相比,NAM的添加极显著升高了奶牛肝细胞内DGAT2、FASN、SIRT1的mRNA相对表达水平(P<0.01)。由此可见,NA和NAM均能有效缓解NEFA诱导的奶牛肝细胞脂质沉积,但NA在综合调控脂质代谢、减轻氧化损伤及提升细胞功能方面更具潜力。