山楂-鸡血藤通过mTOR-自噬-溶酶体通路抗动脉粥样硬化机制研究OA

目的:基于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-自噬-溶酶体通路,探讨山楂-鸡血藤对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)的干预作用及机制。方法:采用8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠高脂饲料喂养8周建立AS模型,并随机分为模型组、辛伐他汀组(3 mg/kg)和山楂-鸡血藤组(5 g/kg),以C57BL/6J小鼠为正常组。灌胃干预6周后,收集血清及主动脉组织。生化法检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。ELISA法检测血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、IL-10、IL-4水平。主动脉大体油红O染色评估斑块面积;HE和Russell-Movat染色分析主动脉窦斑块形态、泡沫细胞和胶原纤维。qPCR检测主动脉p62、微管相关蛋白轻链3(LC3)A/B、溶酶体关联膜蛋白2(LAMP2)、mTOR的mRNA表达;免疫荧光和Western blot分别检测相应蛋白的表达水平。结果:与模型组相比,山楂-鸡血藤干预可降低血清TC、TG、LDL-C(P<0.05),升高HDL-C(均P<0.01),并可降低促炎因子IFN-γ、IL-1β(均P<0.05),升高抗炎因子IL-4(P<0.05),以及缩小主动脉脂质沉积面积(P<0.01),减少泡沫细胞(P<0.01),增加胶原纤维比例(P<0.05)。同时,能够上调主动脉p62与mTOR,下调LC3A/B与LAMP2的mRNA和蛋白表达水平(均P<0.01),综合表明自噬流在此模型中受到抑制。结论:山楂-鸡血藤通过上调mTOR、抑制AS进展期异常增强的自噬活性,改善血脂异常与炎症微环境,并增强斑块稳定性,为“化浊祛瘀”治法提供现代生物学依据。