枸杞多糖联合茶多酚对阿司匹林诱导胃黏膜损伤的治疗作用和机制研究OA

本文旨在研究枸杞多糖(Lyeium barbarum polysaccharide,LBP)联合茶多酚(Tea polyphenol,TP)对阿司匹林诱导的胃黏膜损伤的保护作用和机制。将SPF级雄性昆明种小鼠随机分为5组,对照组、胃黏膜损伤模型组(模型组)、枸杞多糖治疗组(LBP组)、茶多酚治疗组(TP组)、枸杞多糖联合茶多酚治疗组(联合治疗组);除对照组外,其余各组小鼠连续灌胃阿司匹林6 d,诱导胃黏膜损伤,造模后给予药物治疗6 d,对照组小鼠给予等体积生理盐水灌胃,记录小鼠每日体重。12 d后处死小鼠,收集眼眶静脉血和胃黏膜组织,采用Guth评分明确胃黏膜损伤指数,利用HE染色评估胃黏膜组织病理学特征变化,ELISA法检测血清和胃黏膜组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,采用免疫组织化学(IHC)检测胃黏膜组织中的超氧化物歧化酶1(SOD1)和NF-κB因子的表达水平。在体外,采用阿司匹林乙醇溶液孵育人胃黏膜上皮细胞构建胃黏膜损伤细胞模型,检测并比较分析细胞内活性氧水平,采用Western blotting检测氧化应激信号通路相关蛋白p-NRF2和SOD1,以及炎症信号通路相关蛋白p-NF-κB和TNF-α的水平。胃黏膜损伤评价结果显示,与对照组相比,模型组小鼠胃黏膜损伤Guth指数评分显著提高,经各治疗组治疗处理后,Guth指数评分均显著降低(P<0.05),联合治疗组评分最低,且联合治疗组小鼠胃黏膜溃疡抑制率最高达72.41%。ELISA结果显示,与对照组相比,模型组小鼠血清和胃黏膜组织T-SOD活性显著下降,MDA含量显著升高;与模型组相比,各治疗组小鼠组织T-SOD活性均升高,MDA含量均显著降低,其中联合治疗组效应最明显。HE染色结果显示,与对照组比较,模型组小鼠胃黏膜腺体排列紊乱,黏膜上皮细胞大量坏死、脱落,出现炎症细胞浸润;与模型组相比,各治疗组小鼠胃黏膜损伤面积明显减小,程度明显减轻,联合治疗组进一步改善了胃黏膜组织的损伤,腺体排列规则有序,炎症细胞浸润减少。IHC结果显示,阿司匹林诱导胃黏膜损伤后,胃黏膜组织NF-κB磷酸化水平和SOD1表达量显著上升;与模型组相比,各治疗组黏膜组织磷酸化NF-κB和SOD1水平均显著下降,联合治疗组二者水平最低。体外试验表明,与对照组相比,阿司匹林处理后,胃黏膜上皮细胞活性氧水平显著上升,同时磷酸化的NRF2和NF-κB、SOD1以及TNF-α蛋白水平上调,施加LBP和/或TP处理的胃黏膜上皮细胞活性氧水平均降低,上述蛋白水平出现下调变化,联合治疗组效果最明显。枸杞多糖联合茶多酚对阿司匹林诱导胃黏膜损伤的保护作用涉及对氧化应激和炎症反应等机制的抑制。