百两金内生真菌的生物多样性及抑菌活性评价OA北大核心

目的:分离并鉴定苗药百两金内生真菌和探究其抑菌活性.方法:采用组织分离法和平板划线法对百两金根、茎、叶及果实的内生真菌进行分离和纯化,利用插片法对其进行形态学鉴定,结合ITS测序,使用MEGA 11软件进行比对分析得出其种属.内生真菌发酵培养后,抽取滤液,采用纸片扩散法对供试病原细菌(大肠杆菌、普通变形杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠杆菌)进行抑菌活性初筛;选取初筛中具有较好抑菌效果的真菌分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取后,回收溶剂浓缩,得浸膏,最后采用纸片扩散法复筛及倍比稀释法测出其具有抑菌活性提取物的最小抑菌浓度(MIC).结果:分别从百两金中共分离鉴定出 46 株内生真菌,分别从根、茎、叶及果实中分离得到内生真菌 4、13、23 及 6 株.通过ITS序列分析分离的内生真菌分属于 5 纲 10 目 10 科 11 属,包括刺盘孢属 17株,粪壳属4 株,青霉属10 株,间座壳属2 株,座囊菌属2 株,拟茎点霉4 株,黑痣菌属1 株,长蠕孢属1 株,栓菌属1株,烟管菌属2 株,德巴利酵母属1 株,未确定种属1 株.体外抑菌实验表明百两金内生真菌胶孢炭疽菌、皮落青霉菌、法布里德巴利酵母菌各有一株菌株抑菌效果显著,三株菌株发酵液萃取物的MIC为0.66~5.06 mg/mL.结论:百两金的内生真菌种类丰富,且存在具有抑菌活性的内生真菌,分别为胶孢炭疽菌、皮落青霉菌、法布里德巴利酵母菌,其发酵液的萃取物对大肠杆菌、普通变形杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠杆菌几种病原菌有不同程度的抑菌活性.