小黄鱼gfpt1基因克隆及其对高温胁迫和变形假单胞菌感染的响应OA

夏季频发的高温以及养殖过程中变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)引起的内脏白点病已成为制约小黄鱼(Larimichthys polyactis)养殖业发展不容忽视的问题。谷氨酰胺果糖-6-磷酸转氨酶-1(gfpt1)基因是信号转导和应激响应的关键调节因子。为探究gfpt1基因在小黄鱼对高温胁迫和变形假单胞菌感染过程中的响应特征,本研究首次克隆获得小黄鱼gfpt1基因的CDS序列,序列长度为2049 bp,编码682个氨基酸,含有PLN02981 super family保守结构域,同源序列比对发现,其与大黄鱼(Pseudosciaena crocea)相似性最高,达99.37%。荧光定量检测发现,gfpt1基因在各组织中广泛表达,但表达量具有组织差异性,肝脏中的表达量显著高于其他组织。通过荧光定量PCR技术检测32℃高温胁迫和变形假单胞菌感染不同时间小黄鱼肝脏中gfpt1表达水平变化发现,高温胁迫导致gfpt1表达量显著增加,随着高温处理时间的延长,基因表达量呈先升高后降低的变化趋势,6 h时的表达量最高;变形假单胞菌感染同样导致gfpt1表达量发生显著变化,感染后6 h的基因表达量显著低于对照组,随着感染时间的延长,表达量逐渐上升,48 h时达到最高,此时显著高于对照组,随后表达量逐渐降低,至96 h时,其表达量显著低于对照组,说明gfpt1在小黄鱼响应高温胁迫和病原菌侵染过程中发挥了一定的调节作用,但二者响应机制存在明显不同。本研究揭示了小黄鱼肝脏中gfpt1在响应高温胁迫和变形假单胞菌感染的表达变化特征,研究结果为深入解析鱼类响应高温胁迫、病原菌感染等过程中的生理调节机制奠定了重要基础。