猪繁殖与呼吸综合征病毒多表位融合蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立及应用OA
旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)多表位融合蛋白(MEFP)间接ELISA抗体检测方法并验证其应用效果。利用融合表达的PRRSV囊膜蛋白MEFP作为包被抗原,通过优化抗原包被浓度、血清稀释度和二抗稀释度等条件,建立检测PRRSV抗体的间接ELISA方法(MEFP-ELISA)。结果:该方法最佳抗原包被浓度为200 ng/孔,最佳血清稀释度为1∶100,最佳酶标二抗稀释度为1∶500;具有较高的特异性,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)等病原抗体无交叉反应;批内和批间变异系数均低于10%,表现出良好的重复性;用该方法与商品化PRRSV囊膜蛋白抗体ELISA试剂盒同时检测447份临床血清,结果显示,总符合率达92.39%,Kappa系数为0.8219;针对疫苗免疫猪的抗体动态监测结果表明,2种方法的抗体变化趋势较为一致;利用该方法检测湖南省13个核心种猪场的650份临床血清,其抗体总阳性率为34.62%,结合PRRSV N蛋白抗体ELISA试剂盒检测结果,综合分析了猪群的PRRSV感染及免疫状况。综上,本研究建立的MEFP-ELISA方法适用于PRRSV血清学检测,具有良好的临床应用前景。
陈志雄;勾明郗;范杰;唐小明;张坤;刘甜甜;李欣;赵文龙;李润成;葛猛
湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128湖南省动物疫病预防控制中心,湖南长沙410014湖南省动物疫病预防控制中心,湖南长沙410014湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128
农业科技
猪繁殖与呼吸综合征病毒多表位融合蛋白抗体血清学检测
《畜牧与兽医》 2026 (1)
P.71-78,8
国家自然科学基金面上项目(32072871)湖南省重点研发计划项目(2023NK2017)。
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