梨形环棱螺Cyp17a1基因的表达及功能OA

【目的】研究性类固醇激素合成酶基因Cyp17a1在梨形环棱螺体内激素合成过程中的作用。【方法】实验克隆了Cyp17a1的开放阅读框(ORF)区序列,并通过实时荧光定量(qRTPCR)和原位杂交(ISH)实验,分析了梨形环棱螺Cyp17a1的表达模式。采用RNA干扰(RNAi)技术对Cyp17a1基因进行干扰,并用不同浓度的激素浸泡梨形环棱螺,以探索梨形环棱螺Cyp17a1基因在合成性类固醇激素过程中的作用。【结果】梨形环棱螺Cyp17a1基因ORF区有1572 bp,编码氨基酸523个。Cyp17a1基因在梨形环棱螺不同组织中具有不同的表达,除鳃以外,在雄螺中的表达均显著高于雌螺;且主要表达在精巢精母细胞、精细胞中。干扰梨形环棱螺性腺Cyp17a1基因12 h后,发现雌雄螺体内的睾酮含量均显著下降,雌二醇含量均显著上升。用不同浓度的激素浸泡24 d,40 ng/L的17β-雌二醇(E2)以及17α-甲基睾酮(MT)处理后,Cyp17a1基因表达均呈现先降低后升高趋势;200 ng/L E2和MT处理后,Cyp17a1基因表达均呈现先升高后降低趋势。【结论】Cyp17a1参与梨形环棱螺体内性类固醇激素的合成和转化过程。研究结果对探索梨形环棱螺性类固醇激素的合成过程具有重要意义,为梨形环棱螺性别调控、性腺发育等研究提供理论基础。