血红素氧合酶1减轻脂多糖诱导髓核间充质干细胞的炎症反应OA

背景:研究表明,血红素氧合酶1具有抗炎、抗凋亡作用,但它能否在髓核间充质干细胞中发挥抗炎保护作用尚不明确。目的:探讨血红素氧合酶1对炎症微环境下髓核间充质干细胞的保护作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取原代髓核间充质干细胞,通过流式细胞术、三系分化进行鉴定。②采用血红素氧合酶1过表达慢病毒感染髓核间充质干细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达以及Western blot检测血红素氧合酶1蛋白表达水平评估感染效率。③髓核间充质干细胞分为4组:对照组用DMEM/F-12完全培养基培养24 h,模型组、空载体组、血红素氧合酶1过表达组分别为未感染细胞、感染LV-Ctrl细胞、感染LV-HO-1细胞,3组均用添加5μg/mL脂多糖的DMEM/F-12完全培养基培养24 h。采用Western blot、免疫荧光检测炎症相关蛋白表达,Western blot检测核因子κB信号通路蛋白水平。结果与结论:①大鼠髓核间充质干细胞排列紧密,呈贴壁生长,多为纺锤形或梭形,通过流式细胞术检测髓核间充质干细胞具有较高的纯度,三系分化鉴定髓核间充质干细胞具有向脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞分化的能力;②血红素氧合酶1过表达慢病毒感染的髓核间充质干细胞表达绿色荧光蛋白,血红素氧合酶1蛋白表达显著升高;③与模型组相比,血红素氧合酶1过表达组NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3、基质金属蛋白酶13、基质金属蛋白酶3、肿瘤坏死因子α蛋白表达均明显降低(P<0.05);④与模型组相比,血红素氧合酶1过表达组磷酸化核因子κB/核因子κB比值显著下降(P<0.05),磷酸化核因子κB抑制蛋白/核因子κB抑制蛋白也显著下降(P<0.05)。以上结果表明,血红素氧合酶1通过抑制核因子κB信号通路的激活,有效减少了脂多糖诱导的髓核间充质干细胞炎症反应。