高活性脐带间充质干细胞对衰老树鼩胸腺结构和功能的影响OA

背景:胸腺作为免疫系统核心器官,是T淋巴细胞分化、发育、成熟的场所。在青春期时,胸腺就开始发生萎缩退化,是人类最早出现衰老的器官。目前干预胸腺衰老的研究仍较少,高活性脐带间充质干细胞改善树鼩胸腺衰老研究国内尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对衰老树鼩胸腺结构和功能的影响。方法:通过剖腹产获取新生树鼩脐带组织,使用组织贴壁法分离培养获得高活性脐带间充质干细胞,使用吉凯基因绿色荧光蛋白以感染复数值140共培养72 h为转染条件,转染第4代高活性脐带间充质干细胞。20只平均年龄在7周岁的雌性树鼩,随机分为老年模型组与老年治疗组,每组10只;10只年龄在3周岁的雌性树鼩设为青年对照组。老年治疗组通过尾静脉输注第4代高活性脐带间充质干细胞,剂量为1×10^(7)个/kg,1次/d,连续3次;青年对照组与老年模型组不做任何特殊处理。常规饲养4个月取胸腺组织,苏木精-伊红染色观察胸腺组织结构;Masson染色观察胸腺组织纤维化程度;免疫组织化学染色检测衰老标志分子p21、p53表达;免疫荧光染色检测增殖蛋白Ki67、增殖细胞核抗原表达;活性氧荧光染色检测胸腺组织的活性氧含量;免疫组织化学染色检测胸腺组织CD3^(+)总T淋巴细胞数量;酶联免疫吸附实验检测树鼩血清中胸腺素β4水平;DAPI复染胸腺组织细胞核观察高活性脐带间充质干细胞在胸腺组织的分布情况。结果与结论:①老年治疗组树鼩胸腺中观察到吉凯基因绿色荧光蛋白转染的高活性脐带间充质干细胞;②与老年模型组相比,老年治疗组树鼩胸腺紊乱结构得到明显改善,胸腺实质组织增加(P<0.05),脂肪减少,皮髓质界限清晰,胶原纤维占比降低,具有向年轻状态变化趋势;③与老年模型组相比,老年治疗组衰老标志分子p21、p53表达下调(P<0.01,P<0.05);④与老年模型组相比,老年治疗组增殖与凋亡分子Ki67表达呈增加趋势,但差异无显著性意义(P>0.05),增殖细胞核抗原表达增加(P<0.05),活性氧水平表达显著下降(P<0.01);⑤与老年模型组相比,老年治疗组CD3^(+)T淋巴细胞比例呈增加趋势,但差异无显著性意义(P>0.05);⑥与老年模型组相比,老年治疗组血清胸腺素β4水平增加(P<0.01);⑦研究结果表明,高活性脐带间充质干细胞能够改善衰老树鼩胸腺组织结构,降低衰老标志分子表达水平,提高胸腺细胞的增殖活性和胸腺功能。