【目的】探究疏血通及其主要成分水蛭素对Sprague-Dawley(SD)大鼠小脑颗粒神经元(CGNs)凋亡的影响及机制。【方法】体外成熟7 d的CGNs分为存活对照组(用含K+浓度为25 mmol/L的培养基,即25 K组)、凋亡组(用含K+浓度为5 mmol/L的培养基,即5 K组)、以1/50、1/40、1/30、1/20、1/10浓度(稀释50、40、30、20、10倍)疏血通注射液处理组(25 K以及5 K合并疏血通处理组)以及对应不同浓度(2 U/mL、2.5 U/mL、3.34 U/mL、5 U/mL、10 U/mL)水蛭素处理组(25 K以及5 K合并水蛭素处理组),用Hoechst染色法观察并统计凋亡率。在蛋白印迹实验中,在25 K和5 K条件下用1/50、1/10浓度疏血通注射液以及对应2 U/mL、10 U/mL浓度水蛭素处理细胞,用Western blot法检测Cleaved Caspase-3、Bim、VEGF的表达水平。【结果】核染色结果显示,与25 K存活对照组比较,5 K凋亡组凋亡率增加;与25 K存活对照组比较,不同浓度疏血通注射液与水蛭素处理细胞后凋亡率无明显变化;与5 K凋亡组比较,不同浓度疏血通注射液与水蛭素处理细胞后凋亡率下降,且随着浓度的升高,凋亡率下降越明显。Western blot结果显示,与5 K凋亡组比较,不同浓度疏血通与水蛭素处理细胞后Cleaved Caspase-3、Bim蛋白表达水平均下降,VEGF蛋白表达水平升高。【结论】疏血通及其主要成分水蛭素通过抑制Bim表达,进而抑制线粒体依赖的小脑颗粒神经元凋亡。
潘甚豪;曹东芳;赵凡一;赵思捷;张承皓;梁建峰;伍健伟;袁忠民;
广州医科大学第二临床学院,广东广州510260广州医科大学第二临床学院,广东广州510260 广州医科大学附属第二医院神经科学研究所,广东广州510260广州医科大学第二临床学院,广东广州510260 广州医科大学附属第二医院神经科学研究所,广东广州510260 广州医科大学附属第二医院番禺院区神经外科,广东广州511400
临床医学
小脑颗粒神经元;凋亡;疏血通;水蛭素;Bim;血管内皮生长因子
《中山大学学报（医学科学版）》 2024 (004)
P.549-556 / 8
国家科技部纵向子课题(2016YEC1301703);广东省联合培养研究生示范基地项目(2023);广州市科学技术局基金(202002020088);广州医科大学2023年大学生创新创业训练计划项目(S202310570087)。
10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).20240711.003
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