Smac多肽对食管鳞状细胞癌耐药性调节机制的研究OACSTPCD

目的探究Smac多肽(Smac-N7)对食管癌鳞状细胞系Eca-109和紫杉醇(PTX)耐药株(Eca-109/PTX)耐药性的影响和作用机制。方法采用小剂量间歇诱导法建立Eca-109/PTX细胞株,CCK-8法检测PTX对Eca-109和Eca-109/PTX的半数抑制浓度(IC_(50))。使用PTX和Smac-N7分别或联合处理Eca-109或Eca-109/PTX细胞,并将细胞分为:Eca-109组、Eca-109+PTX组、Eca-109+Smac-N7组、Eca-109+PTX+Smac-N7组;Eca-109/PTX组、Eca-109/PTX+PTX组、Eca-109/PTX+Smac-N7组、Eca-109/PTX+PTX+Smac-N7组。采用流式细胞术、试剂盒和Western blot法分别检测各组Eca-109和Eca-109/PTX细胞的凋亡率和细胞中caspase-3活性与Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。结果CCK-8法检测结果显示,随浓度的增加,PTX对Eca-109与Eca-109/PTX的生长抑制率均明显增加(P<0.05),且PTX对Eca-109的IC_(50)[(0.08±0.01)μg/mL]显著低于其对Eca-109/PTX的IC_(50)[(2.47±0.11μg/mL)](P<0.01)。与Eca-109组或Eca-109/PTX组相比,Eca-109+PTX组、Eca-109+PTX+Smac-N7组和Eca-109/PTX+Smac-N7组、Eca-109/PTX+PTX+Smac-N7组细胞中Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),但细胞凋亡率、细胞中caspase-3活性和Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与Eca-109+PTX组或Eca-109/PTX+PTX组相比,Eca-109+PTX+Smac-N7组和Eca-109/PTX+PTX+Smac-N7组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而细胞凋亡率、细胞中caspase-3活性和Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论Smac-N7可在体外通过促进细胞凋亡来改善Eca-109细胞及其耐药株对PTX的敏感度。