为实现木瓜蛋白酶(papain,PAP)的固定化,通过悬浮聚合法在磁性微球Fe_(3)O_(4)表面均匀包覆聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate,PMMA),制备核-壳结构的磁性纳米粒子Fe_(3)O_(4)@PMMA,进一步使PMMA微球表面酯解形成羧基,接枝聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI),将PAP物理吸附在PEI—1800长链上,通过交联剂戊二醛(glutaraldehyde,GA)对PEI进行交联封装,构筑具有磁响应且表面富含氨基的亲水性三维立体结构的载体Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800,实现PAP在纳米磁球表面的封装固定。对载体的形貌特征和理化性质表征分析,评价固定化酶Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800-PAP的酶学性质。结果表明,Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800比表面积为151.30 m^(2)/g,孔容为0.27 cm^(3)/g。Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800-PAP最适温度为60℃,最适pH为6.0,在40~80℃维持80%以上的相对酶活力,在90℃时依然能保持66.84%以上的相对酶活力。Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800-PAP热稳定性良好,在60℃下温育2 h后能保留80%以上的酶活力,在90℃温育2 h后仍能保留36.63%酶活力。Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800-PAP在pH 5.0~pH 9.0均能维持80%以上相对酶活力。经过7次重复使用与洗脱之后,Fe_(3)O_(4)@PMMA-PEI 1800-PAP酶活力依然保留在70%以上。
梁杰;林国荣;周凤超;杨磊;邹汉勋;刘涛;章丽;郭天章;蔡力锋;
莆田学院环境与生物工程学院,福建莆田351100 福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室,福建莆田351100 生态环境及其信息图谱福建省高校重点实验室,福建莆田351100莆田学院环境与生物工程学院,福建莆田351100福建省水手食品有限公司,福建莆田351100福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室,福建莆田351100
轻工业
纳米磁球;固定化;木瓜蛋白酶;接枝;聚乙烯亚胺;交联封装;酶学性质
《食品与发酵工业》 2024 (008)
P.161-168 / 8
福建省自然科学基金(2021J011107,2022J011160)。
10.13995/j.cnki.11-1802/ts.038179
评论