目的:探讨缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)后大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)条件培养液对心肌细胞中缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)表达和缝隙连接功能的影响及其分子机制。方法:(1)将H9c2细胞随机分为5组:对照(control)组、常氧(normal)组、基质金属蛋白酶2抑制剂ARP-100(ARP)组、H/R组和H/R+ARP组。荧光划痕技术评价缝隙连接功能,Western blot实验检测Cx43的表达及磷酸化水平,明胶酶谱法测定条件培养液中基质金属蛋白酶的活性。(2)将SD大鼠随机分为control组、ARP组、缺血再灌注(I/R)组和I/R+ARP组,每组8只。微电极阵列技术采集心律失常发生类型和持续时间,免疫组织化学实验检测心肌组织中Cx43蛋白的表达及分布,Western blot实验检测Cx43的表达及磷酸化水平。结果:与control组相比,H/R组Cx43蛋白表达显著下降(P<0.01),磷酸化水平下调(P<0.01),荧光扩散范围变窄(P<0.01),MMP2活性增加(P<0.01);ARP-100可降低大鼠I/R模型中心律失常评分(P<0.01)。结论:H/R处理的大鼠CFs条件培养液可影响大鼠心肌细胞中Cx43的表达、磷酸化水平及缝隙连接功能,其机制可能与H/R诱导的条件培养液中MMP2活性增加有关,抑制MMP2活性可减少大鼠离体全心I/R模型中心律失常评分。
柏雪;高鸿;黄祥;严旭;胡廷菊;陈锐;安丽;宋雨婷;
贵州医科大学麻醉学院,贵州贵阳550002贵州医科大学麻醉学院,贵州贵阳550002 中山大学附属第一医院贵州医院,贵州贵阳550025 贵州医科大学附属医院麻醉科,贵州贵阳550002贵州医科大学附属医院麻醉科,贵州贵阳550002
临床医学
缺氧复氧;缺血再灌注;心肌细胞;缝隙连接蛋白43;基质金属蛋白酶
《中国病理生理杂志》 2024 (003)
P.465-472 / 8
贵州省卫生健康委科学技术基金资助项目(No.Gzwkj2021-270)。
10.3969/j.issn.1000-4718.2024.03.010
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