目的:探讨长链非编码RNA RP11-85G21.1(lnc85)对肝癌细胞增殖的作用及可能机制。方法:RNA全转录组测序结合实时荧光定量PCR(RT-qPCR)筛选验证肝癌中差异高表达的lnc85;利用lnc85过表达/空载慢病毒感染细胞,构建lnc85过表达肝癌细胞株(OE)和对照细胞(control);RNA下拉实验(RNA pull-down)联合质谱筛选lnc85互作蛋白并进行蛋白免疫印迹(western blotting)验证;MTT实验、细胞克隆形成实验分析lnc85过表达对细胞增殖的影响;生物信息学分析lnc85互作蛋白表达水平及对生存的影响。结果:RNA全转录组测序发现,与对照相比,lnc85在肝癌患者血浆外泌体中明显高表达(P<0.001),RT-qPCR验证lnc85在3种肝癌细胞中显著升高(P<0.01,P<0.001);RNA pull-down联合质谱分析发现CDC42为lnc85的互作蛋白,RT-qPCR证实CDC42水平在肝癌细胞显著升高(P<0.001);且lnc85过表达的肝癌细胞中,CDC42蛋白水平显著上调(P<0.001),细胞增殖能力显著增强(P<0.01);生物信息学分析发现,肝癌患者CDC42的表达水平显著高于健康对照(P<0.001),并随着肿瘤等级的增高而增高;高表达CDC42的肝癌患者预后不良(P<0.001)。结论:lnc85在肝癌中高表达,可能通过靶向调节CDC42的表达促进肝癌细胞的增殖。
宋振宇;杨丽超;廖舟翔;张起;温莎;黄雪静;何敏;
广西医科大学公共卫生学院,南宁530021广西医科大学实验动物中心,南宁530021广西医科大学公共卫生学院,南宁530021 广西医科大学实验动物中心,南宁530021 区域性高发肿瘤早期防治研究重点实验室,南宁530021
临床医学
肝癌;长链非编码RNA RP11-85G21.1;细胞分裂周期蛋白42;RNA下拉实验;细胞增殖
《广西医科大学学报》 2024 (002)
P.186-192 / 7
国家自然科学基金青年基金项目(No.32000865);广西自然科学基金青年科学基金项目(No.2021GXNSFBA220014)。
10.16190/j.cnki.45-1211/r.2024.02.004
评论