致泻大肠埃希氏菌(diarrheagenic Escherichia coli,DEC)是一种重要的食源性致病菌,该研究立足DEC目前流行率高、基层分型困难的现状,建立了快速分型5种DEC的实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。针对DEC的8段特征性毒力基因pic、aggR、lt、st、stx 1、stx2、escV、invE及大肠埃希氏菌属特异性基因uidA设计LAMP引物,优化反应体系,并对方法的分析性能及临床菌株分型效果进行了评价。结果显示,所建立的方法对pic和escV的检出限是1 ng/μL,对aggR、stx 1、invE和uidA的检出限是100 pg/μL,对lt、st和stx 2的检出限是10 pg/μL,该方法灵敏度与特异度均为100%,DEC型别间无交叉反应,对临床菌株的分型与实际结果完全一致。方法快速简便、设备要求低,借助恒温荧光读取设备可在40 min内迅速判定待检菌株是否为DEC及其致病类型,可满足各机构现场快速检测的需求。
李芮;黄艳梅;童晓钰;山珊;刘成伟;谭俣宬;陈芳;刘道峰;
南昌大学公共卫生学院,江西省预防医学重点实验室,江西南昌330019 江西省疾病预防控制中心,江西省食源性疾病诊断溯源重点实验室,青年科研创新攻关团队,江西南昌330029江西业力医疗器械有限公司,江西南昌330008江西师范大学生命科学学院,国家淡水鱼加工技术研发专业中心,江西南昌330022江西省疾病预防控制中心,江西省食源性疾病诊断溯源重点实验室,青年科研创新攻关团队,江西南昌330029 江西师范大学生命科学学院,国家淡水鱼加工技术研发专业中心,江西南昌330022江西省疾病预防控制中心,江西省食源性疾病诊断溯源重点实验室,青年科研创新攻关团队,江西南昌330029南昌大学公共卫生学院,江西省预防医学重点实验室,江西南昌330019
轻工业
致泻大肠埃希氏菌;实时荧光环介导等温扩增;快速检测;毒力基因;分型;食品安全
《食品与发酵工业》 2024 (006)
P.233-240,I0005,I0006 / 10
国家自然科学基金(82003467);江西省重点研发计划(20192BBGL70053,20192BBG70069);江西省自然科学基金面上项目(2020BAB206066);江西省卫健委科技计划(202130977);江西省高层次高技能领军人才培养工程(2021年度)。
10.13995/j.cnki.11-1802/ts.036329
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