Wnt/β-catenin信号通路在郑氏补肝益肾丸治疗骨质疏松症大鼠中的作用OA北大核心CSCDCSTPCD

目的探讨郑氏补肝益肾丸对骨质疏松的影响及其作用机制。方法60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性组(阿仑膦酸钠)和郑氏补肝益肾丸低、中、高剂量组。假手术组切除卵巢附近部分脂肪组织,其余各组均采用切除双侧卵巢法建立骨质疏松症大鼠模型。术后7 d,郑氏补肝益肾丸低、中、高剂量组分别灌胃给药0.315、0.63、1.26 g/kg,阳性组灌胃给药0.5 mg/kg阿仑膦酸钠,假手术组和模型组灌胃等量生理盐水,1次/d,连续灌胃10周。micro-CT扫描股骨远端重建三维图像,扫描电镜观察股骨干骺端骨结构,HE染色观察骨组织病理损伤情况,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色统计破骨细胞数目,ELISA检测血清骨钙素(osteocalcin,OC)、降钙素(calcitonin,CT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)水平,Western blot检测股骨组织Wnt3a和β-catenin蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组骨密度(bone mineral density,BMD)、骨体积比(bone volume/tissue volume,BV/TV)、骨小梁数目(trabecular number,Tb.N)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)和连接密度(connection density,Conn.D)显著降低(P<0.001),骨小梁分离度(trabecular separation,Tb.Sp)和结构模型指数(structure model index,SMI)显著升高(P<0.001);大鼠骨小梁结构不完整、变薄,骨质变得疏松,骨髓腔明显增大,腔内细胞显著变少;破骨细胞数量(P<0.01)、OC水平(P<0.001)明显增加,CT、ALP(P<0.001)水平、Wnt3a和β-catenin(P<0.01)蛋白表达显著降低。采用郑氏补肝益肾丸干预治疗后,BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th和Conn.D显著增加(P<0.01或P<0.001),Tb.Sp和SMI显著降低(P<0.001);骨小梁结构有所完整,排列更有序,骨髓腔明显减少,骨质流失有所减少,破骨细胞数量明显减少(P<0.001),OC水平显著降低(P<0.05或P<0.001),CT、ALP水平(P<0.01或P<0.001)、Wnt3a(P<0.01)和β-catenin(P<0.05)蛋白表达显著增加。结论郑氏补肝益肾丸对骨质疏松有一定的治疗作用,其机制可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,改善骨微结构,促进骨形成。