[目的]建立一种诊断绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR方法,确定肺炎支原体感染的靶器官。[方法]根据GenBank网站上登录的绵羊支原体16S rRNA基因序列,设计并合成2对引物,以肺炎支原体菌株基因组DNA为模板,经过PCR反应条件的优化,通过测序验证扩增产物的正确性,建立了绵羊支原体肺炎病原的巢式PCR检测方法,进而应用建立的方法完成临床阳性病料肺脏、肺淋巴、心脏、肾脏、肝脏、脾脏、皮肤、小肠和外周血检测以及疑似样本肺脏组织的检测。[结果]建立的巢式PCR方法可扩增出864 bp的特异性目的片段,肺脏和肺淋巴为绵羊肺炎支原体感染的靶器官,临床样本巢式PCR检出率与支原体培养鉴定结果的符合率为100%。[结论]建立的绵羊支原体肺炎病原巢式PCR检测方法可用于临床样本的实验室诊断。
杨华;周华倩;黄新;齐宇;余乾;张文喆;杨永林;侯扶琴;
新疆农垦科学院/省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室,新疆石河子832000 石河子大学动物科技学院,新疆石河子832000新疆农垦科学院/省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室,新疆石河子832000石河子总场北泉镇农业发展服务中心,新疆石河子832000新疆西部牧业股份有限公司,新疆石河子832000
畜牧业
绵羊肺炎支原体;巢式PCR;检测方法
《安徽农业科学》 2024 (004)
P.74-77 / 4
新疆维吾尔自治区肉毛兼用绒毛用羊品种选育提升计划项目(2022XJRMY-03);新疆生产建设兵团农业科技创新工程专项(NCG202211);新疆生产建设兵团重大科技项目(2017AA006);国家肉羊产业技术体系项目(CARS-38)。
10.3969/j.issn.0517-6611.2024.04.015
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