[目的]探究白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF)对牛卵母细胞和早期胚胎发育能力及多潜能基因表达的影响。[方法]将牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus oocyte complexes, COCs)分为4组,对照组:在卵母细胞体外成熟(in vitro maturation, IVM)和胚胎体外培养(in vitro culture, IVC)过程中均不添加LIF溶液;处理组1(T1组):IVM过程添加25 ng/mL LIF,IVC过程不添加LIF;处理组2(T2组):IVM过程不添加LIF,IVC过程添加25 ng/mL LIF;处理组3(T3组):IVM和IVC全过程均添加25 ng/mL LIF。用Fluo-3荧光指示剂检测卵母细胞胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度;挑选有第一极体排出的卵母细胞进行孤雌激活,统计各组卵母细胞卵裂率和囊胚率;利用实时荧光定量PCR检测囊胚中多潜能基因的相对表达量。[结果]与对照组相比,培养8 h后,T1组牛卵母细胞胞内[Ca2+]i浓度极显著下降(P<0.01);培养24 h后,T1组牛卵母细胞胞内[Ca2+]i浓度极显著升高(P<0.01)。T1和T3组孤雌激活后卵裂率和囊胚率均显著高于对照组,且T3组囊胚率显著高于T1和T2组(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,T3组囊胚中POU结构域5类转录因子1(POU5F1)和同源框蛋白(NANOG)基因表达量均显著高于对照组,尾型同源盒转录因子2(CDX2)基因表达量显著低于对照组(P<0.05)。[结论]在IVM过程中添加LIF可提高卵母细胞的发育能力,在IVM+IVC全过程添加LIF对早期胚胎发育和多潜能基因的表达有积极作用。
莫显红;陶庆华;房义;梁婧;张佳音;梁小航;徐振军;
赤峰学院化学与生命科学学院,赤峰024000 内蒙古赛科星家畜种业与繁育生物技术研究院,呼和浩特011517福建农林大学动物科学学院(蜂学学院),福州350002中国科学院东北地理与农业生态研究所吉林省草地畜牧重点实验室,长春130062赤峰学院化学与生命科学学院,赤峰024000
畜牧业
白血病抑制因子;多潜能基因;钙离子;胚胎发育
《中国畜牧兽医》 2024 (002)
P.462-469 / 8
内蒙古自治区自然科学基金(2022LHMS03010);内蒙古自治区高等学校科学研究项目(NJZY22130);赤峰学院大学生创新创业训练计划项目(S202310138024);赤峰学院一流学科建设项目(CFXYYLXKB202102);蒙东地区生物资源开发利用创新团队(cfxykycxtd202008)。
10.16431/j.cnki.1671-7236.2024.02.003
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