建立HPLC-MS/MS测定人血浆中维生素K1浓度的方法及其临床应用OA北大核心CSCDCSTPCD

目的 建立一种检测人血浆中维生素K1浓度的高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS).方法 用APCI源正离子模式,用vitamin K1-d7为内标定量,维生素K1和内标的检测离子对质荷比为m/z 451.0→187.0和m/z458.6→194.4,用乙醇沉淀蛋白,用环己烷进行液液萃取.通过使用Synergl 4uFusion-RP C1s(2.1 mm×100 mm,2.5μm)分离样品,流动相:水和0.5％甲酸-甲醇,流速:0.3 mL·min-1.察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度与回收率、介质效应、稳定性.结果 维生素K1在0.2 ～5.0 ng·mL-1内线性关系良好,定量下限为0.2 ng·mL-1.维生素K1批内和批间精密度的相对标准偏差(RSD)为6.98％～ 8.06％和4.58％～9.63％,介质效应RSD＜ 15％,提取回收率52.77％ ～ 68.80％,稳定性RSD＜ 15％.结论 本方法准确可靠,适用于维生素K1血药浓度的分离检测.