从浙江嘉兴人工鱼塘底泥样品筛选到产植酸酶活性较高的假单孢菌(Pseudomonas fluorescens)206.通过简并PCR和TAIL-PCR技术从Pseudomonas fluorescens 206菌株基因组DNA中克隆得到一个新的编码组氨酸酸性植酸酶(HAP)的基因,命名为phyP.该基因ORF全长1 284 bp,编码了427个氨基酸和一个终止密码子,前24个氨基酸为信号肽.将phyP在大肠杆菌中表达,重组蛋白经硫酸铵分级沉淀和阴离子交换柱纯化后达到电泳纯.对其酶学性质分析表明:重组植酸酶PhyP最适pH为5.5,在pH3.5-7.5的条件下具有较好的稳定性;重组植酸酶PhyP最适温度为45℃,在25℃时也具有较高的酶活性,因此植酸酶PhyP在饲料行业,尤其是水产行业具有潜在的应用前景.
李雅楠;黄火清;姚斌;赵青;刘昆;马文康
广州医学院生物化学与分子生物学教研室,广州510182中国农业科学院饲料研究所,北京100081
假单孢菌(Pseudomonas fluorescens);植酸酶;基因克隆与表达;酶学性质
《生物技术通报》 2013 (008)
139-144 / 6
广州医学院科研项目(2006GD058)
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