干化处理对日本落叶松胚状体萌发的影响

本研究以日本落叶松胚状体为材料,根据子叶数量和胚轴形态对胚状体进行分类,分别统计其萌发率。对类型Ⅰ胚状体进行干化处理 0、4、7、14、21、28 天后转移到萌发培养,再次统计萌发情况。以子叶和胚轴伸长、胚根长出作为胚状体萌发的标准。结果表明,胚状体可分为 10 种类型,类型Ⅰ胚状体发生频率最高,达到 56.75%,类型Ⅲ、类型Ⅵ发生频率分别为 12.7 5%、13.25%;其余类型的发生频率较低,都不足 5%。仅有类型Ⅰ胚状体表现出完整的萌发形状,萌发率为 4.48%。其余类型胚状体难以萌发。 挑选类型Ⅰ胚状体进行干化处理。干化处理 7、14、21 和 28 d的胚状体萌发率均有增加,干化处理 14 d的胚状体萌发率最高,达到 69.43%,说明干化处理可以显著促进胚状体萌发。在干化处理过程中,胚状体的颜色有两种变化,将子叶、胚轴变绿,胚根变红称为有干化响应胚状体,将子叶、胚轴颜色无明显变化,胚根微微变红称为无干化响应胚状体。干化处理的 720 个胚状体中,有干化响应的胚状体共有 649 个,其中有 317 个(48.8%)萌发;无干化响应的胚状体共有 71 个,但仅有 11 个(15.5%)萌发。干化处理 14 d,有干化响应的胚状体 162 个(90%),其中 122 个(75.3%)萌发。 研究结果有助于促进体细胞胚胎发生技术在日本落叶松遗传育种中的应用,也为其它针叶树繁育技术的研发和完善提供参考。