一株马尾松赤枯病菌拮抗细菌MK 94-B2的分离与鉴定

[目的]马尾松赤枯病在我国流行范围广、发生面积大、为害树种多，防控困难。本研究旨在分离筛选出对马尾松赤枯病菌具有良好生防效果的拮抗细菌，为该病害的绿色防控提供科学依据。[方法]于安徽省滁州市全椒县瓦山林场采集不同无性系马尾松健康枝条，采用组织分离法进行内生细菌分离。以马尾松赤枯病病原菌庐山拟盘多毛孢为靶标，通过平板对峙法初筛和复筛，确定目的拮抗菌株。采用形态学和分子生物学鉴定相结合的方法对拮抗菌株进行鉴定。[结果]从35个马尾松不同无性系中共分离纯化获得251株内生细菌。初筛后选择出5株抑菌效果较好的拮抗菌，复筛后获得1株对马尾松赤枯病有良好抑制作用的拮抗菌株MK94-B2。该菌株对马尾松赤枯病菌菌丝生长、孢子萌发和芽管伸长有显著抑制作用，其发酵滤液处理后的分生孢子不萌发。连续喷施MK94-B2发酵滤液2天，再接种病原菌孢子悬浮液，马尾松植株发病率降低至40.8％，远低于对照组发病率(99.6％)，显示出该菌株对马尾松赤枯病菌具有较强的抑制效果。经过形态学观察，结合16SrDNA和gyrA基因构建的ML系统发育分析，将菌株MK94-B2鉴定为瓦雷兹芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。[结论]通过本研究分离得到的菌株MK94-B2，不仅为马尾松赤枯病的生物防治提供了新的有益微生物资源，而且其显著的抑制效果预示着在马尾松赤枯病的可持续防控中具有广泛的应用前景。