落叶松内生杀松材线虫细菌的筛选及生防潜能

[目的]筛选对松材线虫具有较高杀线活性的落叶松内生细菌，并对筛选到的高效杀线菌株进行安全性测定和温室防效试验，为今后防治松材线虫病的新型微生物制剂研发奠定基础。[方法]以分离自云南、湖南、河北、吉林、辽宁、黑龙江、内蒙古、山东等8个省份13个采样点的落叶松枝条及针叶的内生细菌为研究对象，利用浸渍法对内生细菌发酵滤液和菌悬液的杀线活性进行测定，采用形态学观察、16srDNA序列和gyrB基因以及构建系统发育树等方法对筛选出的高效杀线细菌进行种类鉴定。通过接种动植物模式种、药敏试验、溶血试验等方法对高效杀线菌株进行安全性测定。对筛选得到的高效杀线细菌在马尾松盆栽苗进行病害防治试验，研究筛选到的高效杀线细菌不同发酵产物对松材线虫病防治效果的影响[结果]1)从375株落叶松内生细菌中，总共筛选出24株杀线活性在50％以上的菌株，其中SD30杀线效果最好，稀释2倍发酵滤液处理12h后，线虫校正死亡率高达100％。稀释8倍发酵滤液处理48h后，线虫校正死亡率仍高达100％。菌株SD30菌悬液对松材线虫也有较强的杀线活性，105cfu/mL浓度处理24h后，线虫校正死亡率达63.8％。2)菌株SD30经形态和分子生物学方法鉴定为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)。3)安全性评估试验中，SD30对烟草苜蓿均没有致病性，对5种抗生素敏感，有较弱的溶血性。4)SD30不同发酵产物对松材线虫病室内防治试验结果表明，SD30菌悬液对松材线生病的防治效果达到55.3％，优于发酵液和发酵滤液。[结论]从落叶松体内筛选到1株对松材线虫具有强杀线活性的苏云金芽孢杆菌菌株SD30，其对松材线虫病具有潜在生防应用价值。