慈竹竹秆多糖提取、纯化及其抗氧化活性研究
[目的]植物源多糖具有抗氧化、抗疲劳、抑菌、免疫调节、降血糖、降血脂等丰富的生物活性,在保健食品、养殖业、化妆品、医药等领域拥有广阔的应用前景。竹类植物资源丰富、生长速度快,其中又以竹秆部位的生物量最大,是天然活性多糖的优质潜在来源。加压热水提取是一种高效、环保的新型提取技术,对于植物源多糖的制备具有独特优势。本研究以慈竹竹杆多糖的高附加值开发利用为目标,优化加压热水提取法制备慈竹杆多糖工艺,阐明所得竹秆多糖的结构特征和抗氧化活性。[方法]本研究通过单因素实验及响应面实验考察提取温度、提取时间和料液比对慈竹竹秆多糖得率的影响,确定最优提取工艺参数;通过sevage法脱除蛋白质、H2O2法脱色素,离子交换柱层析分离纯化;采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)、离子色谱法(IC)、傅里叶红外光谱法(FTIR)和扫描电子显微成像技术(SEM)表征分析纯化慈竹竹秆多糖的初步结构;并通过DPPH和ABTS自由基清除法评估了其抗氧化活性。[结果]结果表明,提取时间和提取温度对慈竹竹秆多糖得率具有较高影响;综合确定慈竹竹秆多糖最佳提取工艺条件为:提取温度130℃、提取时间 33 min、提取料液比 1:15.5 g/mL;在此工艺条件下,总糖得率为 7.8 7mg/g DM,其中多糖得率为 5.12 mg/g DM.经DEAE-52 纤维素柱纯化后得到一个中性多糖组分(PHWE-W),重均分子量(Mw)为 14484 Da,数均分子量(Mn)为 14437 Da;主要单糖组成及摩尔比为甘露糖(0.297)、半乳糖(0.25)、葡萄糖(0.126)、鼠李糖(0.104)、木糖(0.077)、阿拉伯糖(0.063),FT-IR分析表明PHWE-W具有O-H伸缩振动、烷基的C-H伸缩振动、C-H变角振动、吡喃环C-O伸缩振动等多糖特征吸收峰。SEM分析表明,冻干PHWE-W呈现片状,具有蜂窝状孔洞结构,边缘褶皱不规则。抗氧化活性评价结果表明,PHWE-W清除ABTS自由基的IC50值为 3.14mg/mL,4 mg/mL时,对DPPH自由基清除率为 32.78%,表明其具有良好的抗氧化活性。[结论]加压热水提取法提取慈竹竹秆多糖的得率高、效率好,在制备慈竹秆多糖方面具有较好的应用前景。此方法所得多糖分子量均一性好,具有较好的体外抗氧化活性,有深入研究和开发利用的价值。本研究为高附加值全竹化学利用提供了理论和实验基础。
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