三种链格孢属真菌引起旱柳叶斑病的首次报道

[目的]弄清旱柳叶斑病发生情况，明确旱柳 Salix matsudana 叶斑病的病原菌及其分类地位，为该病害防控策略制定提供依据。[方法]本研究于 2019 年在江苏省如东市进行旱柳叶斑病的病害调查及样品采集。采用组织分离法及单孢分离法进行病原菌的分离及纯化。采用科赫法则明确旱柳叶斑病的病原菌。采用形态学鉴定及分子生物学鉴定明确病原菌的分类地位。[结果]旱柳叶斑病发病率为 100%(100/100 株)，平均每棵树有 80%的发病叶片。症状为直径 2-4 mm的深棕色小斑点或边缘不规则的坏死斑块，病斑边缘黑色。病斑上有棕褐色的分生孢子链。共分离得到 8 6 个菌株。通过菌落形态及 ITS 序列比对结果随机挑选 9 个代表性菌株(RD4-1、RD4-2、RD4-3、RD6-1、RD6-2、RD6-3、RD7-1、RD7-2 和RD7-3)进行后续研究。致病性测定表明这 9 个菌株菌均能引起旱柳发病，是旱柳叶斑病的病原菌。形态学特征表明这 9 个菌株隶属于链格孢属。系统发育树表明菌株RD4-1、RD4-2 和RD4-3 与Alternaria arborescens聚为一个分枝，分枝支持率为 BP/PP=97/1.菌株 RD6-1、RD6-2 和 RD6-3 与 A.alternata 聚为一个分枝，分枝支持率为 BP/PP=99/1.菌株RD7-1、RD7-2 和RD7-3 与A.koreana聚为 1 个分枝，分枝支持率 BP/PP=92/0.9.结合形态学特征及多基因串联(ITS、SSU、LSU、GAPDH、RPB2、TEF1-α 和 Alt α 1)构建的系统发育树，这 9 个菌株分别被鉴定为 A.arborescens、A.alternata 和 A.koreana。[结论]旱柳叶斑病的病原为A.arborescens、A.alternata和A.koreana.这是链格孢属真菌引起旱柳叶斑病的国内外首次报道。该结果为制定有效的监测和管理策略奠定了基础。